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宫颈鳞状上皮病变中HPV感染与P16、Ki-67蛋白表达

2011-08-07戴瑜珍喻朝霞胡晓安

皖南医学院学报 2011年6期
关键词:检测

戴瑜珍,何 松,喻朝霞,胡晓安,张 润

(1.安庆市第一人民医院 病理科,安徽 安庆 246003;2.南通市肿瘤医院 病理科,江苏 南通 226361)

宫颈鳞状上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、鳞状细胞癌是女性生殖系统最常见的癌前病变和恶性肿瘤。近年来,人们对宫颈癌的病因、发病机制和临床治疗等研究取得了一定进展。现已明确高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是子宫颈癌的发病原因之一。为了探讨HPV感染和P16、Ki-67蛋白在不同宫颈病变中的表达以及与宫颈鳞状细胞癌的相关性,作者应用原位杂交和免疫组化技术对200例宫颈尖锐湿疣、CIN和宫颈鳞状细胞癌进行分析,旨在提高宫颈上皮病变病理诊断的准确性。

1 材料和方法

1.1 材料 200例标本均选自我院2008年1月~2010年12月间行宫颈活检或Leep刀锥切或宫颈鳞癌手术切除病例。其中尖锐湿疣性病变伴有鳞状上皮增生40例、CINⅠ级50例、CINⅡ~Ⅲ级85例、宫颈浸润性鳞癌25例。另选10例因子宫平滑肌瘤而切除的宫颈标本,且经光镜证实为鳞状上皮无异常者作对照。所有病例行常规HE染色,光镜下观察形态,确定病理诊断及分组。肿瘤分型按WHO(2003)女性生殖系统肿瘤分类标准进行。

1.2 试剂与方法 原位杂交法(ISH)检测HPV 6/11、HPV 16/18,含地高辛标记的 HPV 6/11、HPV 16/18原位杂交试剂盒购自福州泰普生物科技有限公司。ISH检测主要步骤:切片经常规脱蜡至水,微波加热脱水干燥,每张切片滴加25 μl地高辛标记的HPV 6/11、16/18探针,加盖盖玻片,95℃变性后于37℃含杂交增效液的湿盒中孵育过夜(<16 h),清洗后加 A、B、C试剂分化,DAB显色,苏木素复染。将宫颈湿疣切片加阳性探针作为阳性对照,TBS代替阳性探针作为阴性对照。……

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