蝮蛇毒PCA抗血栓形成的实验研究
2011-08-07张根葆
李 曙,张根葆,2,李 伟
(皖南医学院 1.病理生理学教研室;2.蛇毒研究所,安徽 芜湖 241002)
蛇毒是多种生物活性蛋白和多肽的混合物,其中许多组分有明显的促凝血或抗凝血、促血栓形成或溶解血栓、促血小板聚集或抗血小板聚集等功能,特别是蝮科和蝰科蛇毒对血液循环功能的影响尤为明显[1]。近年来本室从蝮蛇粗毒中分离纯化出一种分子量约14~17 ku的具有抗凝活性的蛋白质,其可特异性激活血浆中蛋白C(PC)从而发挥抗凝活性。现通过制备的家兔体外血栓、大鼠半体内血栓及检测血浆凝血功能有关指标,来研究其抗栓效应并报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂与主要仪器 PCA通过离子交换层析法从皖南山区的蝮蛇粗毒中提取;月桂酸钠(上海润捷化学试剂有限公司);TEG®5000型血栓弹力仪系统(美国 Haemoscope Corporation);LBY-F/S5血栓形成仪(北京普利生仪器中心);MC-2000双通道血凝仪(德国美创);阿司匹林肠溶片(进口分装,批号BJ02993)。
1.1.2 实验动物 健康家兔40只(体重2.5 kg左右);SD雄性大鼠60只(体重220 g左右),由本院实验动物中心提供。
1.2 动物模型的复制和血栓的制备
1.2.1 大鼠冠状动脉微血栓模型的复制 SD雄性大鼠腹腔注射3%戊巴比妥钠(0.1 ml/100 g)后,固定,分离颈部,气管插管,呼吸机辅助通气(呼吸频率54次/min,潮气量2 ml/100 g),沿胸骨左缘剪开第二肋骨,暴露心脏,分离主动脉并用血管夹夹闭主动脉根部,迅速以微量注射器从心尖部直接向左心室注入月桂酸钠1.0 mg/kg(浓度10 mg/ml);夹闭20 s后,松开血管夹,心跳稳定后逐层关胸[2]。
1.2.2 动物分组与给药 健康雄性 SD大鼠60只,随……
