杜丽娟 唐学贵 吴至久 李 敏

川北医学院附属医院,四川省南充市 637000

慢传输型便秘的确切病因、发病机制和病理生理的改变现尚未完全明了,目前一系列研究表明,一些胃肠激素血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、5-羟色胺、胃泌素、生长抑素等分泌异常可能与慢性便秘的发病相关[1]。其中血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)作为胃肠动力抑制性神经元,具有松弛胃肠道平滑肌、抑制胃肠蠕动的作用。因此,笔者为了解肠神经递质与慢性便秘之间的关系,选取慢性便秘大鼠模型为研究对象,采用免疫组化技术,检测VIP在慢传输型便秘大鼠模型结肠肌间神经丛的蛋白表达情况,探讨其在慢性便秘发病机制中的作用,期望为临床治疗方案选择提供相应的理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 60只健康SD大鼠,清洁级,雌雄各半,体重180～250g(川北医学院动物实验中心提供),将动物随机分为正常对照组、慢性便秘模型组,每组30只。

1.2 动物模型建立 参照文献[2]制作大鼠慢性便秘动物模型的方法,并加以改进,将配好的含复方地芬诺酯10mg/kg混悬液4ml灌胃,1次/d,连续灌胃14d,建立大鼠慢传输型便秘模型。正常对照组则以等量生理盐水替代复方地芬诺酯进行灌胃。

1.3 主要药物及试剂 复方地芬诺酯(江苏平光制药有限责任公司);大鼠VIP一抗免疫组化试剂盒(北京博奥森生物有限公司)。

1.4 标本制备 两组大鼠均于末次灌胃后24h,颈椎脱臼法处死,剖腹找到盲肠,剪取近端结肠8～10mm,用4℃生理盐水冲净肠内容物及血液,放入4%多聚甲醛中固定,用于免疫组织化学检测。……