人参皂苷-Rg3对兔耳增生性瘢痕中Bcl-2、Bax表达的影响
2011-08-02刘鹤松张可佳赵自然吉林大学第一医院皮肤性病科吉林长春300
刘鹤松 张可佳 吴 杰 赵自然 (吉林大学第一医院皮肤性病科,吉林 长春 300)
细胞凋亡在病理性瘢痕(PS)形成中起着重要的作用。人参皂苷-Rg3(GS-Rg3)是从人参中分离提纯的一种单体,为四环三萜类人参二醇型皂苷〔1〕。大量研究表明GS-Rg3能促进肿瘤细胞凋亡,并抑制其转移。Bc1-2是一种凋亡抑制基因,其编码蛋白能抑制细胞发生凋亡,并能在生长因子缺乏时延长细胞存活时间,甚至使细胞“永生化”〔2〕。Bax是在人前白细胞基因文库中发现的一种凋亡相关基因,基本生物学特性是促进细胞凋亡,这一作用受Bcl-2的调节〔3〕。本实验拟研究人参皂苷-Rg3对兔耳增生性瘢痕中Bcl-2、Bax蛋白质的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 大耳白兔24只,雌雄不拘,体重(2.5±0.2)kg,吉林大学实验动物中心提供。根据时间分为2 w、4 w、6 w 及对照组。
1.2 主要仪器及试剂 主要仪器:高精度轮转式石蜡切片机购自日本的LAICA。电热恒温干燥箱购自中国上海实验仪器总厂。石蜡包埋机、恒温孵化箱购自日本的SANYO。显微镜购自日本的OLYMPUS。CO2孵箱购自美国SHEL LAB;酶标仪购自美国BIO-RAD。免疫组化试剂盒、DAB显示试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。主要试剂:GS-Rg3来自吉林大学基础医学院。柠檬酸盐缓冲液(0.01 mol/L,pH 6.0)、0.01 mol/L(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)为吉林大学白求恩医学院配制。
1.3 动物模型的制备 用速眠新注射液0.2~0.3 ml/kg,肌肉注射。麻醉生效后,强力消毒碘消毒兔耳腹面皮肤,切除2 cm×2 cm的全层皮肤,每耳4~6处,创可贴包扎创面。将动物编号,分笼饲养。3 w后创面形成凸起的增生性瘢痕组织。于四组动物耳部增生性瘢痕组织处行局部封闭注射,实验组注射GS-Rg3(浓度6 mg/2 ml),对照组注射等体积的0.9%生理盐水,每3 d一次。……
