褚文政 王晓彤 佴 玉 于国平 钱采韻

(青岛大学医学院附属烟台毓磺顶医院神经内科，山东 烟台 264000)

散发性阿尔茨海默病(Sporadic Alzheimer's disease，SAD)的病因及发病机制至今不清，通常认为与遗传和环境因素有关。早期的脑葡萄糖代谢异常与痴呆症状明显相关。神经元的糖代谢异常归因于胰岛素/胰岛素受体(insulin/insulin receptor，I/IR)信号系统功能紊乱，ATP减少和I/IR功能紊乱均与β淀粉样蛋白(Aβ)沉积和tau蛋白过度磷酸化密切相关。已发现链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)侧脑室注射(intracerebroventricular injection，icv)可导致脑内胰岛素受体磷酸化能力及内在酪氨酸激酶活性下降，从而引起I/IR转导功能紊乱，进一步引起脑内葡萄糖代谢功能障碍及其他与SAD类似的病理变化。本研究试图验证侧脑室注射STZ后是否可导致脑内能量减少及tau蛋白磷酸化增多等与SAD相似的病理变化。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物和分组 成年雄性SD大鼠44只，体重250～320 g，由广东省实验动物中心提供，按随机数字表法分为STZ组和生理盐水(NS)组，每组22只。每只动物术前、术后第10、21天分别用快速血糖仪测尾静脉血糖，术前，术后无差别。

1.1.2 主要试剂 STZ(美国Introvengen公司);ATP酶检测试剂盒(南京建成公司)。5'-ATP钠盐(美国 Sigma公司)。tau-PSer202，tau-PSer396(美国 Biosource 公司)，tau-PSer404(美国Santa Cruz公司)。Western印迹试剂盒(美国 Roche公司)。SABC显色试剂盒(福建迈新公司)。

1.1.3 主要仪器 大鼠脑立体定向仪(SN3日本);微量注射仪，微量血糖仪(美国强生公司);液相色谱仪(美国Water公司)。电泳仪及图像采集分析系统(美国Bio-Rad公司);高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司)。紫外分光光度仪:UV-120-02型(日本津岛公司);JVC ky-F30B 3-CCD彩色图像摄录输入仪(日本)。

1.2 方法

1.2.1 模型制作 大鼠经10%水合氯醛(3 ml/kg)麻醉后，固定于SN3型脑立体定向仪。……