齐 咏 马利军 牛红丽 程剑剑 吴纪珍 (河南省人民医院呼吸内科，河南 郑州 450003)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种慢性炎症过程，不仅影响肺，也可以引起显著的全身反应，包括体重下降、营养不良、骨骼肌功能障碍等。研究发现50%的重度以及10%～20%的轻、中度COPD患者存在无法解释的体重下降，部分极度消瘦，严重者甚至发生“肺恶病质综合征”，但其确切机制尚未阐明。本研究以稳定期COPD患者为观察对象，观察不同营养状况COPD患者外周血单核细胞核转录因子(NF)-κB和炎症因子表达情况，探讨COPD体重下降与系统炎症的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 30例COPD患者为我院2007年12月至2009年12月门诊及住院患者，均符合我国2002年制定的《慢性阻塞性肺疾病(COPD)诊治指南》中COPD的诊断标准，临床属于稳定期，体重指数(BMI)＜18.5 kg/m2〔1〕。正常对照组30例，均来自门诊健康体检者。两组患者在性别、年龄方面差异无显著性，具有可比性。

1.2 方法 入选对象均进行详细的病史询问及体格检查。

1.3 血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素-8(IL-8)浓度的检测分离血清后采用ELISA法测定TNF-α、IL-8的含量。试剂为美国RB公司产品，操作按照说明书进行。

1.4 外周血NF-κB检测

1.4.1 密度梯度离心法分离单个核细胞 受试者均于上午8～9时空腹取肘静脉血6 ml，肝素抗凝，用淋巴细胞分离液密度梯度离心法常规分离外周血单个核细胞(PBMCs)，将细胞调至1 ×106/ml。

1.4.2 提取核蛋白 分离出淡黄色层单核细胞，移入另一离心管，加入10 ml磷酸盐缓冲液(PBS)，离心3 000 r/min，5 min;吸除上清液，将洗过的细胞移至1.5 ml Ependorff管，再悬浮于1 ml PBS，在高速离心机中离心10 000 r/min×30 s;仔细吸……