孙 洁 李 晶 欧 芹 魏晓东 朴金花 葛堂栋 王迪迪

(佳木斯大学基础医学院生物化学教研室,黑龙江 佳木斯 154007)

细胞在周期时相的变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。细胞周期运转沿着G1期、S期、G2期和M期有序进行。近年来研究表明,细胞周期调控的核心为细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的活性表达与调控和不同周期时相之间的转变的生物学意义,其中以G1/S、G2/M关卡的调节最为重要〔1〕,而细胞周期的完成依赖于一系列正负调节因子的相互作用顺利渡过G1/S、G2/M两个关卡的转变。菟丝子常用作补益中药,药理学研究表明其具有补肾壮阳、提高机体免疫能力、调节内分泌、抗氧化等作用〔2～4〕。本实验旨在观察细胞调控因子p16和cyclinD1的表达,研究菟丝子醇提液的抗衰老机制。

1 材料与方法

1.1 药品及实验动物 选用 Wistar大鼠50只,雌雄各半,体重180～220 g。由佳木斯大学实验动物中心提供(许可证号:SYXK黑20030014)。菟丝子购自佳木斯宝泰医药,由本校生药教研室鉴定。以8倍乙醇回流提取,旋转蒸发器回收乙醇,将菟丝子制成生药浓度为0.15/ml的菟丝子醇提物水溶液,采用盐酸-镁粉实验鉴定菟丝子醇提液中所含成分。

1.2 动物分组及处理 50只大鼠随机分为青年组10只;衰老模型组10只;给药组30只,又分15 d、30 d和45 d组,每组各10只,雌雄各半。各组正常饮食,衰老模型组和给药组按48 mg/kg注射 D-gal,连续注射45 d后,衰老模型组按0.5 ml/100 g体重灌服温开水;给药组按0.8 g/kg体重灌服菟丝子醇提液。连续给药后分别于灌服后第 15、30、45天处死动物,提取肝组织,液氮保存备用。……