刘利波,程 青,唐忠志,陈书琴

(广州军区武汉总医院急诊科,湖北武汉,430070)

宫颈癌[1]是我国常见的恶性肿瘤之一,严重威胁妇女的健康和生命。放射治疗作为其综合治疗的重要手段之一,疗效受到关注。肿瘤对放射线抗拒,正常组织限制放疗剂量的增加以及肿瘤发生远程转移成为放疗失败的主要原因。大量研究表明,环氧化酶-2(COX-2)与肿瘤有高度相关性。在多种恶性肿瘤组织中有COX-2的高表达,它参与肿瘤细胞的转化、生长、凋亡过程,同时也参与肿瘤细胞的运动、迁移、肿瘤新生血管的形成[2-3]。本实验以人宫颈癌细胞株Hela为靶细胞,观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对其体外迁移力及分泌MMP-2的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料与设备

塞来昔布(Celecoxib,商品名:西乐葆,美国辉瑞公司),人宫颈癌细胞株Hela(中国科学院上海细胞研究所),RPMI-1640培养基(GIBCO公司),小牛血清(杭州四季清公司),二甲基亚砜(DMSO,GIBCO公司),MMP-2 human ELISA KIT96T试剂盒(武汉博士德生物),CO2培养箱(上海HERAEUS BB5060型),医用电子直线加速器(SIMENS P-M 型),倒置显微镜(日本OLYMPUS CK-40型),酶联免疫检测仪(BIORED公司)。

1.2 实验方法

细胞培养:人宫颈癌细胞株Hela用25CM2培养瓶贴壁培养于 RPMI-1640培养基中(含10%小牛血清、100 μ/mL 青链霉素),在 37 ℃含5%CO2浓度、饱和湿度培养箱内连续培养,2～3 d换液1次,0.25%胰蛋白酶常规消化传代,取对数生长期细胞做实验。

照射方法:SIMENS P-M型直线加速器6MV-X线垂直照射,剂量率为2 Gy/min,照射时机架旋转180°,贴壁细胞表面加1.5 cm组织等效填充物,源皮距(SSD)为100 cm,射野10 cm×10 cm。

细胞划痕试验:药物塞来昔布(Celecoxib)用二甲基亚砜(DMSO)溶解,加入不含小牛血清的RPMI-1640配制……