张明峰 周守勤 刘淑霞 彭晨星 郭惠芳 (河北医科大学第二医院免疫风湿科,石家庄050000)

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种高度致残性疾病。采取有效措施控制滑膜组织增生是改善预后,延长患者寿命的关键所在。积极探索疗效可靠、毒副作用小、经济适用的缓解病情药物,也成为了各风湿病学者研究的重点课题之一。三氧化二砷(As2O3)在急性白血病和各类实体瘤的治疗中已取得了举世瞩目的成就,并已经应用于临床[1,2]。但其对风湿性疾病的治疗作用仍在探索之中。前期体外细胞培养研究显示,As2O3可通过抑制信号转导及转录活化因子(Signal transducer and activator of transcription,STAT)1信号转导通路,抑制高迁移率族蛋白1诱导的滑膜细胞增殖[3]。本研究借助胶原诱导的关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型进行动物实验,进一步探讨As2O3对滑膜增殖的抑制作用,以及对STAT和细胞因子信号传导抑制蛋白(Suppressor of cytokine signaling,SOCS)信号通路的影响,为将来As2O3应用于临床提供一定理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 As2O3(黑龙江伊达药业公司生产);兔抗大鼠p-STAT1、p-STAT3单克隆抗体(Cell Signaling公司);SOCS1、SOCS3多克隆抗体、羊抗大鼠FITC-IgG二抗(Santa Cruz);小鼠抗大鼠PCNA单克隆抗体(北京中山生物工程公司),破膜剂(美国eBioscience公司);牛Ⅱ型胶原(美国Sigma公司);弗氏完全佐剂(美国Sigma公司);卡介苗(上海生物制品研究所);免疫组织化学SP试剂盒(生物晶美公司);Epics-XLⅡ型流式细胞仪(Beckman Coulter);光学显微镜(日本Olympus)。

1.2 动物模型制备及分组

1.2.1 实验动物 雄性Wistar大鼠42只,8～12周龄,体重(160±20)克,购于河北医科大学实验动物中心,清洁级动物室内养殖,室内定期进行紫外线照射,所用饲料、水及用具均经定期灭菌处理。……