仇 炜，赵 娟，吕雨虹，赵俊霞，王彦玲，雷宇华

(1.北京大学医学部，北京 100191;2.河北医科大学细胞生物学教研室，河北石家庄 050017)

肺癌是我国常见的呼吸系统恶性肿瘤，其中尤以小细胞肺癌的恶性程度最高，严重影响人类的生命健康。山奈酚(kaempferol)属黄酮醇类化合物，主要来源于姜科植物山奈(Kaempferia galanga L)的根茎，具有抗肿瘤、抗氧化及组织保护［1-2］等多种生物活性及药理作用。目前已知，山奈酚对于非小细胞肺癌［3］、卵巢癌［4-5］、前列腺癌［6］、乳腺癌［7］等多种肿瘤均有抑制作用，而山奈酚对人小细胞肺癌是否存在同样的抑制作用目前尚未见报道，因此本实验通过观察山奈酚对人小细胞肺癌H446细胞株增殖及凋亡的影响，探讨其作用机制，旨在为小细胞肺癌的药物治疗及拓展山奈酚的临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 试剂及设备 试剂山奈酚购自Sigma公司(批号:54608195，纯度 ＞96%)，用 DMSO溶解配制成80 mmol·L-1的储存液，分装，避光保存于-20℃备用;人小细胞肺癌H446细胞购自北京协和细胞资源中心;新生牛血清(newborn calf serum，NCS)购自杭州四季青生物工程材料有限公司，RPMI 1640培养基购自美国 Gibco公司，流式细胞仪 FACSTARCalibur(美国Becton Dickinson公司)、倒置荧光显微镜(日本Olympus公司)、DAPI(美国Invitrogen公司)。p53抗体、bax抗体及bcl-2抗体均购自Santa Cruz公司。

1.2 细胞培养及分组 H446细胞用含有NCS(体积分数为0.1)的RPMI 1640培养基，置于37℃，5%CO2、饱和湿度环境下进行培养，传代后进行实验。实验分为实验组和对照组，实验组细胞用山奈酚进行处理，对照组细胞用终浓度为0.001(体积分数)的DMSO处理。各组细胞在处理前换用新鲜的含NCS(体积分数为0.01)的RPMI 1640培养基饥饿培养24 h。……