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加减尪痹舒安对胶原诱导性关节炎大鼠症状及血清炎症因子的影响

2011-07-18王伟钢

中日友好医院学报 2011年4期
关键词:血清实验模型

赵 颖 ,王伟钢 ★,肖 诚

(1.中日友好医院 国际医疗部一病区,2.中日友好医院 科研处,北京 100029)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以对称性多关节炎病变为主要临床表现的全身性自身免疫性疾病。其特点是关节滑膜的慢性炎症、软骨吸收、骨质破坏和骨质纤维化。RA这种以关节炎症为主的慢性反复发作的全身性疾病,属中医学“痹证”范畴。本文旨在建立胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型[1]的基础上观察加减尪痹舒安对CIA大鼠的治疗效果,并检测其对模型鼠血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)[2,3]、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)[4,5]水平的影响,以探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与药品、试剂、仪器

选用160g~180g SPF级雄性Wistar大鼠 32只,由中国药品生物制品检定所提供,动物许可证号:SCXK(京)(2008-0005)。 在中日友好医院 SPF级动物室喂养,实验动物室许可证号:SYXK(京)(2005-0025)。

甲氨喋呤(methotrexate,MTX):上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂生产,批号060502,用无菌蒸馏水制成水药液,浓度为0.1mg/ml。

加减尪痹舒安的制备:川断12g、补骨脂9g、炒黄柏 9g、地骨皮 9g、知母 12g、骨碎补 9g、赤白芍各 9g、秦艽20g、威灵仙 12g、制乳香 6g、制没药6g、忍冬藤20g、络石藤20g、桑寄生20g、蚕砂10g、地鳖虫 6g、怀牛膝 9g、青风藤 15g、生熟地各6g,共含生药 234g,水煎过滤,浓缩至 90ml,生药浓度2.6g/ml。4℃储存备用。

实验试剂有牛Ⅱ型胶原(sigma公司产品);弗氏不完全佐剂 (Freund’s Adjuvant incomplete,sigma公司产品);醋酸(北京现代东方精细化学品有限公司产品);10%中性福尔马林 (北京现代东方精细化学品有限公司产品);EDTA缓冲液 (北京现代东方精细化学品有限公司产品);IL-1β、TNF-α放免试剂盒(华英生物有限公司产品)。

实验仪器:低温冷冻离心机(北京医用离心机厂)、显微镜 OlympusBX-60(日本)、电子天平(1/1000,A2000S)德国产。……

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