李双凤 王亚平 冉 珂 唐正国 王 丹 肖艳英

近年来研究发现，通过激活线粒体ATP敏感性钾通道[mitoK（ATP）]，可引起线粒体钾离子内流，线粒体膜去极化而降低膜电位，降低钙摄取驱动力，抑制Ca2+内流，有效防止线粒体钙超载，减轻细胞缺血再灌注（I/R）损伤[1]。有报道硫化氢（H2S）能增加心肌细胞ATP敏感性钾通道[K（ATP）]的开放率，对抗缺血损伤[2]。本研究探讨硫化氢预处理的延迟相对大鼠心肌的保护作用及mitoK（ATP）对此作用的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠32只，级别SPF/VAF，体质量300～320 g，购自湖南斯莱景达实验动物有限公司。NaHS、伊文思蓝、氯化硝基四氮唑兰（TTC）和5-羟葵酸（5-hydroxydecanoate，5-HD）均购自美国SIGMA公司。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 采用随机数字表法将大鼠随机分为4组，每组8只。假手术组（Sham组）：行冠状动脉穿线但不结扎；心肌缺血再灌注组（IR组）：开胸结扎左冠状动脉前降支（LAD）30 min，松解后再灌注2 h；硫化氢预处理组（HS组）：静脉注射硫化氢供体NaHS 50 μg/kg，24 h后同IR组处理；5-HD+HS组（HD组）：结扎前15 min静脉注射5-HD 5 mg/kg，其他同HS组处理。

1.2.2 缺血再灌注模型建立 大鼠经腹腔推注3%戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，多导联心电监测。气管插管，动物呼吸机控制呼吸，潮气量8～10 mL/kg，频率70次/min。在心尖搏动最明显处之上一肋间隙开胸，切开心包，确认左冠状动脉圆锥支，在圆锥支之后用7-0丝线结扎LAD，立即可见左室前壁紫绀充血，心率减慢，血压一过性下降，心电图监测S-T段明显抬高，确认阻断成功。

1.2.3 检测指标 （1）心肌梗死（心梗）面积。4组各取6只大鼠于再灌注末再次阻断LAD，经颈内动脉逆向注入1%伊文思蓝2 mL行心肌染色，充分染色后迅速剪下心脏，低温生理盐水冲洗后将左心室切成厚约2 mm的切片。……