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木聚糖酶产生菌的筛选鉴定及木聚糖酶基因(Xyn B)的克隆

2011-06-29广西人口和计划生育研究中心毅梁方方赖志强卢玉发廖玉英

中国饲料 2011年23期

广西人口和计划生育研究中心 莫 毅梁方方* 赖志强 卢玉发 廖玉英

广 西 畜 牧 研 究 所 何仁春 黄丽霞

华南农业大学动物科学学院 杨 琳

木聚糖是一种由β-1,4-木糖苷键连接形成并带有多种取代基的多聚糖,主要存在于植物细胞壁中,在自然界中是除纤维素之外第二丰富的可再生物质资源(Prade,1995)。植物性饲料中含有大量木聚糖,它们在动物消化道内,不易被消化酶消化,从而增加了动物消化道内的食糜黏性,降低饲料消化率和营养的吸收(张晓晖等,2007)。微生物木聚糖酶能水解木聚糖生成长度各异的木寡糖,对半纤维素降解起着关键作用,其中以内切方式降解木聚糖分子中1,4-β-D木糖苷键的O-糖苷水解酶(O-glycoside hydrolases)为主,其水解产物主要为木糖、木二糖及木三糖等低聚木糖,还有少量阿拉伯糖(徐君飞等,2007)。研究表明,木聚糖酶可改善消化道功能、增强免疫力、提高饲料利用率和生产性能、减少粪便对环境的污染(杨会涛等,2007)。

为了获得酶活性较高的木聚糖酶产生菌,本试验从长期堆放青贮饲料堆下土壤中取样,并通过木聚糖富集培养基和筛选培养基分级筛选出一株产木聚糖酶活性较高的菌株,对其进行了细菌形态学鉴定、16 S rRNA PCR扩增鉴定;而后使用Oligo 6.44生物软件,根据上述鉴定结果,以Genebank中公布的木聚糖酶Xyn B基因序列为模板,设计特异引物扩增其Xyn B基因,为日后木聚糖酶Xyn B基因的重组高效表达和在动物饲料添加剂中应用提供材料。

1 材料与方法

1.1 土样 土壤样品取自广西畜牧研究所黄牛室长期堆放青贮饲料堆下,采集富含腐败木质纤维材料的土壤样品若干份。……

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