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放疗对耳蜗组织结构及脂质过氧化产物/抗氧化酶的影响

2011-06-14谢利红唐安洲尹时华谭颂华

山东医药 2011年35期

谢利红,唐安洲,尹时华,谭颂华

(广西医科大学第一附属医院,南宁530021)

放射治疗是鼻咽癌的主要治疗手段,感音神经性耳聋为其常见并发症[1],但其发病机制尚不明确。有学者认为,放疗后早期发生的感音神经性耳聋,可能为放疗后脂质过氧化作用产生的一系列自由基反应导致毛细胞凋亡[2]。2010年,我们观察了放疗后豚鼠内耳形态学改变以及耳蜗脂质过氧化产物丙二醛(MDA)及抗氧化物酶超氧化物歧化酶(SOD)活力,为探讨感音神经性耳聋的发生机制提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物 白化豚鼠66只,体质量250~350 g,雌雄不拘。电耳镜检查无中耳感染,耳廓反应灵敏。随机分为观察组60只和对照组6只,观察组右耳为照射耳。豚鼠喂养方法:自由饮水进食,室温23~26℃。

1.2 方法

1.2.1 照射方法 观察组用1%戊巴比妥钠(3.5 μl/g)麻醉固定后,用GWXJ80型60Co远距离治疗机对右侧耳颞部行一次性60Co照射70 Gy,辐射深度2.0cm,照射范围为2cm ×2cm,源皮距 80cm,自制铅板遮盖非照射部位。对照组不予照射。

1.2.2 耳蜗组织结构观察 观察组分别于放疗后1、4、7、14 和30 d 用1% 戊巴比妥钠(3.5 μl/kg)麻醉后,断头经腹侧取听泡,暴露耳蜗并在蜗尖钻孔,推镫骨底板脱位,刺破圆窗膜,用4%多聚甲醛固定液灌流固定后,再放入固定液4℃固定24 h以上。用10%EDTA脱钙10~14 d,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,耳蜗中轴切片。石蜡切片脱蜡和水化,苏木精染液染色10min,1%盐酸乙醇分色,流水冲洗10min蓝化,0.5%伊红染液染色1min,依次经70%、85%、95%、100%乙醇脱水,二甲苯透明,封片。光学显微镜下(×400倍)观察照射耳蜗结构变化。

1.2.3 耳蜗组织MDA含量和SOD活性测定 取出-80℃冰箱保存的每只豚鼠的右侧耳蜗,置于微型玻璃匀浆器中,先加入0.5 ml生理盐水,于冰上研磨约15min后将匀浆液倒入1 ml的EP管中。……

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