曾健文，莫鉴锋，胡国洪，吴小伟，周理林

(清远市人民医院，广东清远511500)

近期研究发现［1］，微小染色体维持蛋白 2(MCM2)是一种细胞增殖相关因子，是DNA复制许可因子，可以反映肿瘤细胞的增殖能力，是多种肿瘤预后不良的预测指标。现收集我院2005年8月～2010年7月确诊的53例膀胱癌组织，采用免疫组化法检测其MCM2的表达变化，分析MCM2与膀胱癌临床病理参数的关系及其对膀胱癌预后的评估价值。

1 资料与方法

1．1 临床资料 53例膀胱癌手术治疗患者中，男38例，女15例;年龄35～80(62．05±10．71)岁。术前均无放、化疗等抗肿瘤治疗病史。TNM分期:T1期31例、T2期15例、T3期5例、T4期2例;N035例、N115例、N2+N33例;有4例出现远处转移，其中骨转移2例，肺转移1例，肠道转移1例。按照膀胱癌恶性程度分级系统［2］:G1级28例，G2级20例，G3级5例。53例术后随访 1～6 a，平均2．5 a。复发18 例，复发时间在术后 0．5 ～2 a，平均1．5 a。本组53例的膀胱癌组织均为我院病理科存档标本，常规石蜡包埋，厚5 μm切片。另取15例正常膀胱黏膜组织作为正常对照。

1．2 MCM2检测方法 ①主要试剂:羊抗人MCM2单克隆抗体(美国Santa Cruz Biotechnology公司)，免疫组化SP-9003试剂盒。②染色方法:所有标本均采用免疫组化SP法染色，按试剂盒说明书操作，以人类乳腺癌组织的核酸染色作为阳性对照，PBS替代一抗作为阴性对照。③染色结果判定:细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒者为MCM2阳性细胞。采用双盲法观察，高倍镜下(×200)随机选择5个视野，用高清晰度图像采集处理系统(IPP软件)分析阳性信号的表达和分布，并以累积分光密度(IOD)为参数进行半定量检测分析;在显微镜下随机选择5个视野，计数每个视野阳性细胞数百分比，取其均值。……