王刚 周广东 蒋朝华 曹卫刚

肢体淋巴水肿是淋巴循环系统最常见的疾病之一，其原因为淋巴管先天发育不良或继发性淋巴管阻塞等。目前，淋巴水肿的治疗方法包括物理治疗及手术治疗等，虽然有一定效果，但仍不理想。寻求有效、简便、安全且能针对淋巴水肿的治疗方法，一直是国内外淋巴医学工作者努力的方向。

近年来，应用脂肪间充质干细胞（Adipose derived stem cells，ADSC）修复缺血损伤的研究已显示出良好的应用前景。研究发现，ADSC在体内可以向血管内皮分化，形成血液回流的通道，从而修复缺血损伤[1]。另外，促进淋巴管再生的研究发展也很快，如VEGF-c与其受体VEGFR-3相互作用可促进受损区淋巴管再生，可减轻肢体淋巴水肿[2]。血液循环与淋巴循环具有同源性，ADSC是否可用于淋巴管修复？能否形成淋巴回流的通道？如果可行的话，因ADSC来源广，获取的细胞数量多，且对病人损伤小，无疑可以成为淋巴水肿的新的治疗方法。

本研究通过分离提取ADSC，并植入鼠尾淋巴水肿淋巴回流阻塞区，通过微淋巴管荧光示踪，检测其是否可以参与淋巴管再生并促进急性淋巴水肿的消退。

1 材料与方法

1.1 主要的实验仪器与试剂

CO2细胞培养箱（Forma，美国）；培养皿（Corning，美国）；50 mL 离心管（Falcon，美国）；低速离心机（Heraeus，美国）；倒置相差显微镜（Olympus，日本）；荧光体式显微镜（Leica，德国）；手术显微镜；游标卡尺；胶原酶NB4（包含Ⅰ型胶原酶，Ⅱ型胶原酶和中性蛋白酶1，Serva公司），MesenPRO RS Medium（Gibco，美国），DMEM （HyClone，美国），胎牛血清 （SAFC Bioscience， 美国）；PBS 缓冲液；Dextran rhodamine（Eugene Oregon，美国）。

1.2 主要培养液和试剂

基础培养液：LG－DMEM，10%胎牛血清，L-谷氨酰胺 300 μg/mL，抗坏血酸 50 μg/mL，青霉素、链霉素各100 U/mL。……