Egb761对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用
2011-06-13崔晓鹏秦太昌
崔晓鹏,秦太昌,刘 斌
肺缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)是指缺血器官、组织经血液再灌注后缺血性损伤进一步加重的病理生理现象,损伤常见于心肺联合移植、肺动脉袖状切除、体外循环等手术,是患者发生肺动脉高压、肺水肿及呼吸衰竭的最主要原因,直接关系到患者生命维护及其生活质量。本文旨在阐述缺血/再灌注机制,以探讨其防治措施。
1 材料与方法
1.1 动物与分组 雄性Wistar大鼠(山西医科大学动物中心提供)30只,体重250 g~350 g。随机分为 3组,每组 10只,分别为假手术组(S组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)和银杏叶提取物+缺血/再灌注组(EGb+I/R组)。各组间大鼠的体重及鼠龄无统计学意义。
1.2 施加干预 银杏叶提取物+缺血/再灌注组(Egb761+I/R组),银杏叶提取物(Egb761)于术前3 d开始腹腔注射30 mg/(kg◦d)。假手术组(S组)及缺血/再灌注组(I/R组)于相同时间点给以等量生理盐水腹腔内注射。
1.3 动物模型制作 参照Eppinger等[1]大鼠肺I/R模型加以改进,将Wistar大鼠以20%水合氯醛 300 mg/kg~350 mg/kg腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,行颈部正中切口,分离出气管、右侧颈静脉和颈动脉,气管切开、插管,接动物呼吸机行机械通气(吸入室内空气,呼吸频率40/min,潮气量10mL/kg~15 mL/kg),右侧颈静脉插管、固定,接微量注射泵;然后经左侧第5肋间开胸,游离左肺门,静脉注射肝素100U。静息5min后,于呼气末用套线阻断左主支气管、左肺动脉和左肺静脉。30 min后开放,进行再灌注2 h。实验结束后,从颈动脉快速抽取动物血,并切取左肺标本。
1.4 观察指标与方法 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒由南京建成公司提供(批号:14004),按说明书进行检测。肺超微结构,左下肺采用2.5%戊二醛固定,磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次,1%锇酸后固定,梯度丙酮脱水,包埋切片,醋酸铀-枸橼酸铅复染,应用透射电子显微镜观察超微结构。……
