梁 爽,王晓华,赵艳明,杨 华

(1.河北工程大学 医学院,河北 邯郸056029;2.邯郸市中心医院 神经外一科,河北 邯郸056000)

肿瘤/睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类肿瘤特异性抗原,只在肿瘤中表达,在正常组织(睾丸和胎盘除外)中均不表达,因而成为肿瘤疫苗研究中最有价值的一类抗原。目前有关这一类抗原在直肠癌中的联合表达情况报道较少。我们应用免疫组织化学方法(SP法)对68例不同临床分期的直肠癌患者肿瘤组织中多种CTA的表达进行了检测,以期为CTA疫苗用于直肠癌患者的免疫治疗提供理论依据,并检验CTA的表达率与临床分期的关联性。

1 材料和方法

1.1材料68例直肠癌标本均选自我院附属医院病理科2003-04/2008-11临床资料完整的存档蜡块,均为直肠腺癌,20例癌旁正常肠黏膜作对照。瘤体及癌旁正常组织均有病理切片证实。全部病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。其中高分化癌29例,中分化癌17例,低分化癌22例。按照Dukes分期,A期20例,B期18例,C期21例,D期9例;伴淋巴结转移31例,无淋巴结转移37例。男性41例,女性27例;年龄22-78岁(平均56岁)。

1.2免疫组织化学检测所有标本均经10%的中性福尔马林固定,常规脱水,石蜡包埋,4 μ m连续切片,分别作HE和SP染色。浓缩型鼠抗人MAGE-1单克隆抗体、鼠抗人NY-ESO-1单克隆抗体、鼠抗人SCP-1单克隆抗体均购自Upstate公司、SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥公司。SP染色按试剂盒说明操作,3%双氧水室温孵育5-10 min除去内源性过氧化物酶的活性,微波修复抗原15 min(800 V),常规免疫组化标记。以正常睾丸组织作为阳性对照;用PBS代替一抗作阴性对照。……