亢春彦,陶志敏,肖 红,张秀芝,薛玉仙

(1.河南职工医学院病理学教研室,河南 郑州451191;2.河南大学护理学院)

近年来随着遗传学的兴起与发展,人们发现在肿瘤的发生发展中,基因的过甲基化是一个重要事件,甚至有可能是恶性肿瘤形成的早期事件,而且是肿瘤特有的[1]。O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)是人类DNA修复系统中最重要的直接修复酶,在抵御烷化剂所致的细胞突变和死亡中起重要作用[2]。目前已有许多研究证实MGMT过甲基化的检测有助于肿瘤的早期诊断及预后判断[3、4]。本研究观察了MGMT过甲基化与非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)临床病理特征的关系,现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料以2006年3月到2009年7月在河南省胸科医院胸外科手术治疗的77例肺癌患者作为研究对象,归入研究组,包括男53例,女24例,年龄35-70岁,平均52.3±2.5岁,所有患者肺部病变组织标本均经病理诊断为NSCLC且术前均无化疗及放疗史。另外选取20例肺良性病变患者作为对照组,包括男12例,女8例,年龄33-68岁,平均50.1±2.2岁,肺部病变组织标本均经病理证实为正常肺组织。

1.2方法

1.2.1基因组DNA的提取和修饰 DNA提取试剂盒购自上海生工生物有限公司,按试剂盒推荐方法进行DNA的提取。以紫外光分光光度仪测浓度并计算其含量,取1μ gDNA并参照说明书步骤采用亚硫酸氢钠修饰试剂盒进行修饰,使DNA序列中的非甲基化胞嘧啶(C)转变为尿嘧啶(U),甲基化的C则不变,在随后的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)反应中U变为胸腺嘧啶(T)。

1.2.2合成引物 根据亚硫酸氢钠修饰后非甲基化和甲基化DNA序列改变的不同设计并合成两对引物 。……