靳英丽,陈丽波,刘超英,鲁继荣

(吉林大学 1.白求恩医学院 药理教研室,吉林 长春130021;2.中日联谊医院;3.第一医院)

支气管哮喘是一种以气道高反应性和慢性气道炎症为特征的变态反应性疾病,多种炎症细胞及细胞因子介导了这一炎症过程。与哮喘发病有关的细胞因子很多,其中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是哮喘发病过程中的重要因素。神经生长因子(NGF)是对神经元的生长、分化、存活期延长具有促进作用的一类神经营养因子。Bonini S等[1]在其研究中发现,哮喘患者血清NGF水平增高,且过敏性哮喘病人血清NGF水平比非过敏性哮喘病人高。对过敏性哮喘小鼠进行抗NGF处理,可明显减轻哮喘引起的气道高反应性。提示在哮喘发病的机制中,可能存在NGF与其它炎症因子的协同作用,而此类协同的具体过程和发生机制,则有待进一步研究。

本研究应用抗NGF抗体对哮喘小鼠模型进行处理,研究NGF被动性降低对哮喘小鼠血清及肺组织TNF-α表达水平的影响,由此探讨NGF参与哮喘发病的可能机制。

1 材料与方法

1.1材料动物:选取30只8-10周龄雌性BALB/c小鼠,体重20-24克,由吉林大学白求恩医学院动物室提供。试剂:卵白蛋白(OVA,Sigma公司)、兔抗小鼠β-NGF多克隆抗体及小鼠TNF-αELISA检测试剂盒(武汉博士德生物有限公司)、TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1及DNA Marker(大连宝生物公司)。设备:超声雾化器(德国百瑞公司)、水平电泳仪和酶标仪(Bio-Rad公司)、PCR仪(AB-2700型)(基因公司)、凝胶图像分析系统(UVI公司)。

1.2实验动物分组及模型制备取30只8-10周龄雌性BALB/c小鼠,随机分为3组:正常对照组、哮喘组、NGF阻断组,每组 10只。……