刘 然,王 苹,范东艳,范洪学,郭 丽*

(1.吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,吉林长春130021;2.长春市中心血站;

3.吉林大学第一医院;4.西藏大学医学院)

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种发病率极高且较难治愈的疾病。因为SCI最终导致瘫痪,所以不仅给患者本人及家庭带来严重的经济负担也带来了巨大的社会问题[1,2]。如何在SCI后维持脊髓神经元存活和轴突的再生能力,延缓其变性坏死是目前神经科学和临床科医学迫切需要解决的难点和热点问题。神经营养因子 (neurotrophic factors,NTFs)是一类调节神经系统发育、成熟、维持神经功能的天然蛋白质。神经营养因子是神经元存活和发挥功能的基础,具有影响神经系统发育成熟,调节神经递质的传递,影响神经损伤的病理反应,促进神经元修复和再生等功能,所以神经营养因子是保护神经元和促进其修复再生的必需因子。文献报道,SCI后脑源性神经生长因子(BDNF)和NT3的表达上调可以促进脊髓神经元、轴突和髓鞘的再生修复[3,4]。本实验通过观察BDNF和NT3在体外脊髓神经元培养中的作用,比较它们对脊髓神经元生长发育作用的影响,为临床上应用NTFs治疗脊髓损伤提供实验依据。

1 材料与方法

1.1实验动物与器材动物:Wistar大鼠购自吉林大学医学院动物中心。细胞培养试剂:DMEM/F12和胎牛血清购自Gibco公司。胰蛋白酶购自Gibco公司。兔抗鼠神经元特异性烯醇化酶 (neur onals pecific enolase,NSE)和Alexa Fluor 555标记的山羊抗小鼠IgG的二抗购于Molecular Probes公司,倒置相差显微镜Olympus公司。激光扫描共聚焦显微镜Olympus公司。Ad-BNNF和Ad-NT3为本实验室……