木瓜蛋白酶的酶学特性及其在饲料工业中的应用
2011-06-08冯定远陈芳艳
饲料工业 2011年20期
冯定远 陈芳艳
木瓜蛋白酶类主要存在于番木瓜的根、茎、叶和果实中,以未成熟的果实乳汁中含量最高(叶启腾等,1999;赵元藩等,1999;乙引等,2000)。由于木瓜蛋白酶具有很强的分解蛋白质能力,并且有水解酰胺键和酯键的特性,因而广泛应用于医药、食品、纺织、制革、饲料及染料等工业(吴显荣等,1988)。
1 木瓜蛋白酶的概况
由木瓜乳汁加工而成的木瓜蛋白酶不是纯酶。这些粗酶中除含有木瓜蛋白酶外,还含有溶菌酶、半胱氨酸蛋白酶、纤维素酶、葡聚糖酶、谷氨酰胺以及低分子量的巯基化合物。据等电点的不同,木瓜乳汁中所含的半胱氨酸巯基酶可分为三大类:木瓜蛋白酶(papain)、成分复杂的木瓜凝乳蛋白酶(Chymopapain)、溶菌酶(Lysozyme)。木瓜蛋白酶的pI为9.55,木瓜凝乳蛋白酶pI为10.10,木瓜肽酶pI>11.0,在近中性的条件下进行阳离子交换柱层析,可以很容易地将这三大类酶分开。在木瓜乳汁中木瓜蛋白酶占可溶性蛋白的10%左右,木瓜凝乳蛋白酶占45%,木瓜溶菌酶(Lysozyme)占 20%(凌兴汉等,1998)。
2 木瓜蛋白酶的结构
2.1 木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶是最早被发现、研究和得以广泛应用的酶,1937年Balls和Lineweaver用分级盐析法从新鲜木瓜汁中提取了结晶木瓜蛋白酶,1970年完成了木瓜蛋白酶的序列测定,1971年通过X晶体衍射法测定了其三级结构。
木瓜蛋白酶的相对分子质量为21000,为单一肽链,由212个氨基酸残基组成,1969年Husain和Towe报告了该酶的氨基酸排列顺序(见图1)。
木瓜蛋白酶共有七个半胱氨酸残基,其中六个形成三个链内的二硫键,另外一个游离的半胱氨酸残基为活性中心的必需氨基酸残基之一。D……
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