宋建华，刘玉玲

黄芪为我国传统中药，在我国分布地域广，具有补气、升阳、益卫、固表、利水等作用，现代药理学研究结果表明，黄芪含有多种有效成分，如皂甙类、多糖类等，其中多糖类组分是发挥补中益气作用的主要成分，具有抗肿瘤活性[1]。中药多糖组分的提取方法较多，但提取物多含较多蛋白、纤维等杂质，影响其使用效果。本文建立了高纯度黄芪多糖的提取、纯化方法，并对黄芪多糖主要组分进行分析。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂 黄芪（产地山西沁源县，3年生，经中医专家鉴定为绵黄芪），95%乙醇 （阿拉丁试剂上海有限公司），盐酸（阿拉丁试剂上海有限公司），乙醚、苯酚（北京化工厂），蒸馏水（实验室制备）。

1.2 仪器 高效液相仪（淮安瑞美克仪器有限公司），紫外光谱仪（美国McPherson公司），FA135S型电子天平（上海豪昇科学仪器有限公司），氢氧化钠 （碧云天生物试剂有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 粗多糖的提取 黄芪烘干恒重后粉碎，2号筛筛选粉末，称取 100 g，置提取器中，加蒸馏水浸泡 12 h（W∶W=1∶5），11 000 g×min高速离心离心10 min，保留上清。沉淀再加蒸馏水浸泡 12h（W∶W=1∶5），11000g×min 高速离心离心 10min，保留上清，弃去沉淀。合并上清液，加入4倍体积的95%乙醇，静置 1 h，2 500 g×min 5 ℃低温离心 20 min，收集沉淀，冷冻干燥后得淡黄色粗多糖。

1.3.2 粗多糖的纯化 粗多糖溶入适量蒸馏水中，采用Sevag法除去蛋白，置DEAE-52离子交换柱（2.5 cm×32 cm）洗脱（洗脱液：pH 8.0，0.45%NaCl，流速：50 ml/h）。洗脱液采用Sephadex G-200凝胶柱层析。各组分经透析、浓缩、醇沉、洗涤、真空冷冻干燥，得纯化黄芪多糖。

1.3.3 纯化多糖纯度检测

1.3.3.1 多糖标准曲线制备 精密称取恒重无水葡萄糖15 mg，用……