刘登群，龙 爽，王军平，史春梦，冉新泽，粟永萍

第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室，重庆400038

正常的胃肠道运动功能是机体消化吸收营养物质、传递神经信号及抵抗外源致病菌入侵的重要生理基础。胃肠道运动功能的产生和维持是胃肠道神经元、平滑肌细胞以及Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal，ICC)三者协同作用的结果［1-2］。由于 ICC 能够自发产生电慢波，且能够介导神经递质从神经元向平滑肌的传导过程，因此探讨ICC的生物学行为对进一步阐明胃肠运动机制、治疗胃肠运动功能障碍具有重要意义。目前对ICC的研究多限于动物在体模型，也曾文献报道过ICC的体外分离培养，但其通常使用幼年动物，分离效率、细胞纯度均有较大差异。本文在综合分析以往报道的基础上，提出可以联合使用酶消化-组织块培养方法培养成年C57BL/6小鼠的空肠ICC。该方法能够较方便地实现ICC的体外培养，为进一步研究其在胃肠运动中的作用及机制提供了一定的细胞模型。

1 材料与方法

1.1 实验动物与试剂 正常6～8周龄的C57BL/6小鼠购自第三军医大学实验动物中心。DMEM/F12培养基购自 Hyclone公司，重组小鼠干细胞因子(mSCF)、Ⅱ型胶原酶购自Sigma公司，胎牛血清购自Gibco公司，大鼠抗小鼠c-Kit抗体购自eBioscience公司，小鼠抗平滑肌激动蛋白(SMA)购自Santa Cruz，封闭用正常山羊血清购自北京中山公司，100×青霉素-链霉素溶液、Cy3标记山羊抗大鼠二抗、FITC标记羊抗小鼠二抗、Fluo-3 AM钙离子荧光探针购自碧云天公司。……