Nod2基因突变与小肠CD相关性的研究
2011-06-08林菊生唐晓丹
李 岩,范 红,林菊生,唐晓丹,万 苹
1.云南省第一人民医院消化内科,云南昆明650000;2.华中科技大学同济医学院消化内科肝病研究所
CD(Crohn’s disease)是一种可累及消化道任何部位,以全肠壁炎症、非连续性病变为特点的全身性肉芽肿性炎症。迄今CD的确切病因及发病机制尚不清楚。近来国外很多研究机构如Michigan大学医学院的研究人员在研究CD的遗传倾向时发现了位于16号染色体上Nod2,该基因突变时编码的Nod2蛋白通过激活核因子-κB(NF-κB)来促进肉芽肿性炎症[1],这在 CD 的发病中起着重要作用。尽管CD最常累及终末回肠及近段结肠,约占65%,但单独累及小肠者仍达20%~30%[2]。国内外对CD患者进行了Nod2的相关研究,该研究数据主要来自于结肠镜确诊的CD患者,而对小肠CD尚无相关报道[1-2]。而现在双气囊小肠镜(DBE)应用实现了小肠CD的诊断和组织取材,使得对小肠CD病因及发病机制的研究成为可能[2]。因此,我们通过对DBE确诊的小肠CD患者取材进行Nod2基因突变与小肠CD相关性的研究。
1 材料与方法
1.1 材料 收集我市各三甲医院2004年4月~2007年3月内镜室标本,通过DBE进行病变部位组织取材,经病理学检查确诊的组织标本小肠CD 24份,结肠CD 44份,溃疡性结肠炎(UC)40份,健康对照(非炎症性肠病者)50份。CD和UC的诊断标准参照2001年中华医学会消化病学分会制定的标准[3]。DNA提取试剂盒购自U-Gene公司。TRIZOL购自BioBasic Inc公司,Canada。mRNA Selective PCR Kit(AMV)Ver1.1购自TaKaRa公司,日本。抗NF-κB P65购自Santa Cruza公司,美国。免疫印迹化学发光试剂(ECL Reageat)购自上海普飞生物技术有限公司。HRP标记二抗、抗β-ac-tin单克隆抗体、AP标记二抗购自Gibco-BRL公司。凝胶成像及分析系统是PC gene公司图像分析软件。……
