张伟东 刘丽芳

(黑龙江八一农垦大学军事体育部，黑龙江 大庆 163319)

大量研究表明，杜仲叶提取液具有调节血压、降低血糖、调节血脂、抗菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞生长等药理作用，以及延缓衰老、美白养颜、滋阴补肾、强壮筋骨等功效〔1～4〕。杜仲的主要功效成分有木脂素类、环烯醚萜类、苯丙素类、黄酮类、多糖类、杜仲抗真菌蛋白，此外杜仲还含有丰富的营养成分有氨基酸、脂肪酸、维生素、微量元素等〔5〕。本文观察杜仲叶提取液对运动训练后大鼠血脂和骨骼、肌肉以及心肺的影响，为杜仲提取液的临床应用提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 试验药物 杜仲叶提取液(含量55%以上)。购自西安阿房宫药业有限责任公司。

1.2 动物 雄性SD大鼠，体重180～220 g。购自陕西中医研究所实验动物中心，啮齿类动物饲料喂养，自由饮食。实验环境:室温18℃ ～26℃，相对湿度45% ～65%，自然光照。

1.3 方法 将动物随机分为安静组、训练组和药物+训练组，分笼饲养。训练组和药物+训练组在60 cm×60 cm×65 cm的内壁光滑的玻璃池中进行无负荷游泳训练，水温25℃ ±1℃，水深55 cm，每日游泳训练20 min，每周6 d，星期日休息，共4 w。用双蒸水配成1%杜仲叶提取液水溶液，自由饮食。安静组喂以同体积的双蒸水，至训练之日起每日给药。在最后一次训练至力竭。

1.3.1 血脂测定 所有大鼠摘眼球取血。总胆固醇(TC)含量、甘油三酯(TG)含量测定采用酶比色法测定，高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VDL)含量测定采用清除测定。

1.3.2 羟脯氨酸含量测定 收集处死大鼠血液、左腿部肌肉、左腿股骨、颈部皮肤、心、肺等组织器官各3～5 g。除血液外其他样品均置生理盐水中洗净血液，并用滤纸吸干、称重，再分别(包括血液)以pH7.2柠檬酸缓冲液低温匀浆，每份样品按10 mg加6 mol/L HCl 2 ml，125℃加热2 h消化，取消化液2 ml加10 mol/L NaOH 1 ml，再用蒸馏水加至5 ml，过滤，取过滤液0.2 ml加柠檬酸缓冲液、氯氨T各1 ml，置室温10 min，过氯酸2 ml，反应5 min，再加100 ml/L对二甲基氨基苯甲醛1 ml，置60℃水浴中20 min，冷却后用724分光光度计在562 nm处比色测定。对尿液的测定，以处死小白鼠前1 d收集的全部尿液，先加酸分解，然后在过量的丙氨酸条件下用氯氨T氧化羟脯氨酸，硫代硫酸钠中止氧化，再用对二甲基氨基苯甲醛试剂显色测定羟脯氨酸含量。

1.4 统计学处理 计量资料以x±s表示，两组间数据比较行t检验。

2 结果

2.1 杜仲叶提取液对大鼠血液TC含量的影响 训练后大鼠血清TC的含量无明显变化，但给药组血清TC含量显著降低，说明杜仲叶提取液能明显的降低运动训练大鼠血清TC含量。见表1。

表1 杜仲叶提取液对运动训练大鼠血清TC、TG含量的影响(x ± s，n=6)

2.2 杜仲叶提取液对大鼠HDL、LDL和VLDL含量的影响与安静组比较，训练组HDL含量无明显变化，但LDL、VLDL的含量显著升高;但给药+训练组与训练组、安静组比较血清HDL的含量显著升高，LDL、VLDL的含量明显降低。见表2。

表2 杜仲叶提取液对大鼠血清HDL、LDL和VLDL含量的影响(x ± s，n=6)

2.3 羟脯氨酸含量测定 给药+训练组大鼠肌肉、骨骼、皮肤、心、肺中羟脯氨酸合成均显著增加，而单纯运动也在一定程度上对羟脯氨酸合成有促进作用;血液和尿液中羟脯氨酸含量，运动与安静组变化均不太明显，给药+训练组组变化明显。见表3。

表3 杜仲对不同组别大鼠组织中羟脯氨酸含量的影响(x ± s，n=6，mg/g)

3 讨论

运动系统主要由骨骼、肌肉和关节构成，并与机体的心肺功能关系密切。胶原蛋白(Collagen)又称胶原，是由三条肽链拧成的螺旋形纤维状蛋白质。胶原蛋白是动物结缔组织重要的蛋白质，结缔组织除了含60% ～70%的水分外，胶原蛋白占了约20% ～30%。人体成分中有16%左右是蛋白质，胶原蛋白占体内蛋白质总量的30% ～40%，故成年人体内约有3 kg左右胶原蛋白，主要存在于皮肤肌肉、骨骼、牙齿、内脏(如胃、肠、心肺、血管与食道)与眼睛等处。杜仲可通过改变肌肉、骨骼、皮肤、心、肺中胶原蛋白合成的能力进而影响运动系统的功能。胶原蛋白由纤维细胞合成，胶原纤维由许多胶原微纤维组成，胶原微纤维则由原胶原组成。原胶原肽链中含有羟脯氨酸及羟赖氨酸残基，它们常在原胶原α肽链Y位置上出现，而不带羟基的脯氨酸则常在X位置上出现。羟脯氨酸及脯氨酸总数在原胶原分子中约占22%左右，也是维持原胶原分子三联螺旋构型的重要组成部分。因此测定体内组织中羟脯氨酸(γ羟基β吡咯烷α羧酸)含量则可充分表现组织胶原蛋白合成的能力，而胶原蛋白分解又可释放出游离的羟脯氨酸或含羟脯氨酸的寡肽，通常5%～10%随尿排出。胶原蛋白合成过程中，先形成原胶原再经过聚合及共价交联，才产生胶原微纤维，未经共价交联的原胶原分子较胶原纤维更易分解，当胶原蛋白合成增强时可溶性原胶原分子增多，分解随尿排出的羟脯氨酸也会增多。因此，尿中羟脯氨酸排出量不仅是胶原分解强度的指标也与体内胶原合成密切相关。本研究说明运动本身有一定促进胶原蛋白合成的能力，但均没有给药组明显。总之，杜仲对机体组织胶原蛋白合成有明显的促进作用，将有利于机体加速体内胶原蛋白的新陈代谢，有防止机体衰老、保持组织器官结构的完整性和增强其功能的作用。杜仲叶提取液能消除机体内的自由基，从而提高肌肉运动能力和抗疲劳的能力〔6〕，对运动训练大鼠补充杜仲可以提高大鼠的运动能力。

1 盛军利，孙桂菊.杜仲的功效学研究现状及其应用前景〔J〕.医学综述，2006;12(16):1022-4.

2 董大鹏，张学俊，王庆辉，等.杜仲叶中抗氧化活性成分的提取〔J〕.贵州工业大学学报(自然科学版)，2006;35(4):1-3.

3 张瑛朝，张延敏，郭代立，等.复方杜仲叶合剂对人体降压作用的实验研究〔J〕.中成药，2001;23(6):418-21.

4 罗丽芳，吴卫华，欧阳冬生，等.杜仲的降压成分及降压机制〔J〕.中草药，2006;37(1):150-2.

5 程光丽.杜仲有效成分分析及药理学研究进展〔J〕.中成药，2006;28(5):723-5.

6 赵 晖，李宗友.杜仲叶药理作用研究(Ⅱ)-抗疲劳及愈伤作用〔J〕.国外医学·中医中药分册，2000;22(4):211-5.