张 育，张学增，沈维干，许金鑫，马莹莹

(1.江苏扬州大学临床医学院，江苏扬州 225001;2.山东青岛卫生学校，山东 青岛 266071)

类风湿性关节炎是一种常见的可致残的慢性炎症性疾病，其最主要的病理表现为滑膜炎，滑膜细胞呈肿瘤细胞样增殖并产生多种炎症因子，如IL-1和TNF-α等。金雀异黄素(Genistein，Gen)又称为染料木素，是一种来源于豆类植物和齿类植物异黄酮类化合物，其化学名为4，5，7-三羟基异黄酮。体外实验研究表明Gen可能够抑制多种肿瘤细胞的增殖，故Gen已经成为广受各界关注的一种非营养素成分［1-2］。AKT又被称为蛋白激酶 B(protein kinase B，PKB)，是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是PI3K/AKT信号传导通路中的关键分子。磷酸化的AKT诱发的细胞生长，经多种途径促进细胞存活，是重要的抗凋亡调节因子［3］。近来许多研究表明［4-5］，炎症因子能够通过活化AKT信号转导通路活化多种炎性细胞，参与RA疾病的发生与发展。我们采用体外细胞培养技术，拟研究Gen对CIA大鼠成纤维样滑膜细胞中AKT及其磷酸化蛋白p-AKT表达的影响，探讨Gen调节CIA大鼠成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡蛋白表达与其影响AKT表达和磷酸化蛋白p-AKT表达的关系。

1 材料与方法

1.1实验细胞来源用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠动物模型，取滑膜细胞原代培养，通过流式细胞术检测第4代细胞纯度达到顶峰，故用第4代细胞进行实验。

1.2实验试剂和药物Gen购自Sigma公司(相对分子质量为270.2，纯度不低于99%);小牛血清购自杭州四季青公司;DMEM培养基购自美国GIBCO公司;二甲基亚砜(DMSO)购自上海生工生物工程有限公……