王 微，吴晓东，时全星，樊 荣，裴建明

(第四军医大学1.口腔医学系、2.基础部生理学教研室，陕西 西安 710032)

缺血性心律失常的发病机制尚未得到彻底阐明。已有研究证明致命性的室速或室颤都与心室肌细胞间缝隙连接(Gap junction，GJ)的主要构成蛋白Connexin43(Cx43)在结构与功能上的重塑有关［1］。作为一个钙相关的功能蛋白［2］，Cx43 的重塑与细胞内钙在心肌缺血时发生的瞬间变化密切相关［3］。近年来阿片受体及其激动剂对缺血心肌的保护作用正成为国内外研究的热点，与心血管功能调节有关的阿片受体分为μ、δ、κ 3种亚型，其中以κ阿片受体分布占主导［4］。我们以往对κ阿片受体的研究显示，选择性受体激动剂U50，488H激动κ阿片受体后，可通过抑制交感递质的释放、抑制β受体的作用、抑制L型钙通道、以及影响心室肌Cx43的重塑等途径来抑制缺血性心律失常的发生［5－10］。本研究通过在大鼠心肌缺血模型中先后给予钙通道激动剂(Bay k8644)和U50，488H，观察κ阿片受体的抗心律失常作用及对抗Cx43重塑的调节作用是否被翻转，来判断U50，488H是否通过抑制钙通道减少外钙内流参与了κ阿片受体的抗缺血性心律失常作用。

1 材料与方法

1.1材料健康♂SD大鼠30只，体质量250～350 g，由第四军医大学实验动物中心提供。微型动物呼吸机由第二军医大学仪器厂生产。RM－6280智能多道生理记录仪及分析处理软件由第四军医大学设计，成都仪器厂生产。Bio-Rad化学发光仪及其所配置的Quantity One软件由加拿大Bio-Rad公司设计和生产。U50，488H及Bay k8644均购自Tocris公司，Western blot所用小鼠抗Cx43抗体购自Abcam公司(ab11369)，小鼠抗Tubulin抗体购自上海碧云天公司，辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗小鼠抗体购自北京ZSGB-BIO公司，RT-PCR所用TRIzol试剂及逆转录试剂盒均购自日本TaKaRa公司。……