陈裕新 ， 夏志兰 **， 刘东波 ， 康信聪 ， 熊兴耀

（1.湖南农业大学园艺园林学院，湖南 长沙 410128；2.国家中医药管理局亚健康干预技术实验室，湖南 长沙 410128；3.湖南农业大学生物质能源研究中心，湖南 长沙 410128）

灵芝 （Ganoderma lucidum）属真菌界、担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、灵芝科、灵芝属，为大型的药用真菌。有着 “仙草”的美誉，是名贵的药材，被广泛应用于药品和食品中，具有益心气、益肺气、安神补肝、坚筋骨、通九窍等多种药效，同时还兼有养生美容，延年益寿的功效[1]。

单核菌丝又名初生菌丝，是由孢子直接萌发形成的菌丝，每个细胞内只有1个细胞核；双核菌丝又称次生菌丝，是由二条遗传性状不同的异质菌丝相互融合而成，每个细胞内有2个细胞核，具有锁状联合，是形成子实体的菌丝形态。分离单核菌株是大型真菌杂交育种的必经之路[2，3]，同时也研究担子真菌极性、结合方式和交配型基因及遗传多样性分析的重要材料[4－7]。

目前，国内外对灵芝的栽培、药理作用研究较多，但对灵芝的孢子萌发、杂交育种及其单核、双核菌丝的遗传特性研究较少，本文就灵芝单核菌丝与双核菌丝的生长特性进行比较试验，为灵芝杂交育种提供理论依据和技术指导，为灵芝的基础生物学研究提供实验借鉴。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料美国灵芝 （Ganoderma americanense），由湖南农业大学食用菌研究所提供。

1.2 试验方法

采用钟罩法 （子实体弹射法）[8]收集无菌孢子，配置无菌孢子悬浮液，并梯度稀释到光学显微镜100×视野下只有2个～3个孢子，最后直接涂布至平板，置于28℃下暗培养，获得单个孢子萌发菌落。……