李洪荣

（福建农业科学院食用菌研究所，福建 福州 350014）

菌种保藏的目的是保持菌种高产优质的优良性状，尽量减少或降低菌种的衰退速度和死亡率，使菌种保证统一和不被污染，能够长期或较长期地在生产中应用。因此菌种保藏工作是我所遗传育种研究室长期研究的课题。菌种保藏的基本原理是采用低温干燥、真空隔氧的方法，来控制菌丝的繁殖和减慢菌丝代谢的速度，使它处于休眠和半休眠状态，常用的保种方法有低温斜面保藏、液体石蜡法保藏、硅胶保藏、冷冻干燥保藏、蒸馏水保藏和液氮超低温保藏方法等，其中液氮保藏方法经过30年来的研究证实是一种最稳定、长效的微生物菌种保藏手段，蘑菇菌种的液氮保藏方法研究最早在美国模式菌种库ATCC和宾州大学进行，Hwang于 1972年应用超低温技术保藏蘑菇菌种的初步结果表明是有希望的[1]，随后San Antonio于1978年报道了应用液氮成功地保藏蘑菇菌种达9年之久，其生存能力和蘑菇产量不受影响[2]。

Jodon等也报道了8个商业栽培双孢蘑菇品种液氮保藏10年后，没有明显的形态和生理特性的变化[3]。英国温室作物研究所Challen MP等对蘑菇菌种的保藏进行了系统的研究，认为液氮可长期保存蘑菇菌种，并于1986年发表了液氮菌种使用聚丙烯吸管安瓿的保藏容器的改进。我国中科院微生物研究所陈燕妍，于1987年进行了担子菌菌种24属43种122株的液氮超低温保藏的研究，结果表明不同冷冻保护剂对菌株存活率有很大的影响，冷冻的快慢、解冻的快慢也是影响菌株存活率的主要因素之一[5]。……