巴戟天糖链对缺氧复氧损伤内皮细胞的血管形成作用研究
2011-05-29冯国清刘心玉张培君胡香杰
王 宁,周 鹏,2,冯国清,刘心玉,张培君,吴 斌,胡香杰,乔 鹏
(1.郑州大学基础医学院药理学教研室,河南郑州 450052;2.河南中医学院一附院,河南郑州 450001)
巴戟天(radix morinda officinalis,RMO)为茜草科植物,肉质根入药,是我国著名的四大南药之一,具有传统的补肾壮阳、强筋骨,祛风湿等作用。巴戟天糖链(morindae officinalis oligosaccharides,MOO)是巴戟天醇提物的主要有效成分,本课题组既往研究表明,MOO具有明显的减轻缺氧/复氧或缺血/再灌注对心肌的损伤[1]。可以促进鸡胚绒毛尿囊血管生成[2];增加MVD的数量,而且上调与血管新生相关的VEGF、bFGF蛋白的表达,具有促进缺血心肌血管新生的作用[3]。本实验选择HUVEC为研究对象,首次从细胞水平观察MOO对缺氧损伤内皮细胞迁移及管腔样结构形成的影响,旨在进一步观察MOO促血管生成效应,并为其在缺血心肌保护及促进缺血心脏建立侧枝循环方面的作用提供更加直观的实验依据。
1 材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验细胞 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)郑州大学生物系多肽生化实验室祁元明老师惠赠。
1.1.2主要药品及试剂 巴戟天糖链(Morinda officinalis oligosaccharides)的制备:巴戟天(购自广东省德庆县药材公司,一等品,河南省药品检验所李杰鉴定)生药15 kg粉碎后,分次用体积分数为0.70的乙醇在90℃水浴中煮60 min,将乙醇提取液旋蒸回收乙醇,得浓缩液。用适量的蒸馏水稀释后,分别用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,弃去乙醚、乙酸乙酯、正丁醇可溶部分,得到醇提物的水溶部分,用层析柱方法分离收集糖链部分,其纯度为98.76%。实验用蒸馏水稀释配成9.0、3.0、1.0 g·L-13种浓度药……
