傅 璐，郭瑞鲜，莫利求，崔 宇，赵春梅，胡 芬，陈培熹，冯鉴强，

(中山大学1.中山医学院生理学教研室，2.附属第一医院黄浦院区麻醉科，广东广州 510080;3.广东省东莞卫生学校，广东东莞 523018)

慢性吗啡镇痛耐受限制了其在临床上的广泛应用，深入研究其机制具有重要的临床意义。研究证实［1-2］，N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate，NMDA)受体参与吗啡镇痛耐受，应用NMDA受体拮抗剂可以减弱吗啡镇痛耐受，但其具体机制迄今尚未完全清楚。

NMDA 受体由 NR1、NR2(A、B、C、D)亚基组成，其中含有NR2B亚基的NMDA受体与疼痛的传导密切相关［3］。脑室内注射NR2拮抗剂明显减轻福尔马林引起的大鼠疼痛［4］。在骨癌痛模型中，小鼠脊髓和背根神经节NR2B表达均明显增多［5］。导水管周围灰质注射NR2B拮抗剂可明显降低外周持续性的炎性疼，而在小鼠后爪注射完全弗氏佐剂，导水管周围灰质NR2B明显增加，但是NR2A却没有改变［6］。

在原代培养的成年大鼠海马的祖细胞，NMDA受体拮抗剂可抑制c-Jun和c-Fos的表达［7］。在原代培养的大鼠纹状体细胞和小脑颗粒细胞，NMDA通过兴奋谷氨酸受体激活JNK(c-Jun氨基末端激酶，c-Jun N-terminal kinase)［8］。本实验室研究证明［9-10］，吗啡镇痛耐受可激活大鼠脊髓背角的NMDA受体NR2B亚基，非竞争性NMDA受体拮抗剂MK-801可抑制慢性吗啡引起的JNK激活及吗啡镇痛耐受。上述结果提示，NMDA受体位于JNK和c-Jun信号通路的上游，因此，本文推测，c-Jun可能介导吗啡镇痛耐受。本实验旨在探讨:(1)探讨吗啡镇痛耐受时能否激活脊髓c-Jun;(2)p-c-Jun主要在脊髓哪种类型的细胞表达;(3)c-Jun是否参与NR2B介导的吗啡镇痛耐受。

1 材料与方法

1.1主要试剂盐酸吗啡购自青海制药有限公司;Ro256981购自Sigma公司;p-c-Jun和c-Jun兔抗大鼠单克隆抗体购自Cell Signal Technology公司。……