张付利，厉永强，史 齐，李延红，皇甫超申

(河南大学医学院环境医学研究所，河南开封 475004)

亚硝酸钠是一种常见的亚硝酸盐，广泛存在于自然界水体、蔬菜中，在食品加工过程中常用作添加剂防腐和增加风味，同时也广泛用于工业防腐和医药领域，因此广受人们关注。亚硝酸盐有可能与人体二级胺反应形成亚硝胺类物质，通常被认为有致癌作用。流行病学研究表明摄入过多的亚硝酸盐有导致消化道癌发生和致畸的危险，由于一直缺乏有力的实验支持，目前并不清楚亚硝酸盐对癌细胞的确切作用［1］。最近发现，人体亚硝酸盐不仅来自外源性饮水和食物，也可以由一氧化氮氧化内源性产生。亚硝酸盐在人体缺氧或酸性环境下，可以还原为一氧化氮，因此，维持人体一定剂量的亚硝酸盐可以调节生理机能，减轻心血管病的危害［2］。在这种背景下，研究亚硝酸盐对癌细胞生物作用就显得尤为迫切。课题组前期发现［3］，亚硝酸钠对人肝癌细胞SMMC-7721增殖具有双相剂量效应，但机制不清，为此，课题组对亚硝酸钠诱导的人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡相关的早期增殖基因和缺氧诱导因子表达做了进一步研究。

1 材料与方法

1.1主要试剂与仪器

1.1.1主要试剂 亚硝酸钠(NaNO2)，天津市晨福化学试剂厂(分析纯);DMEM培养基(Gibco，with high glucose);新生牛血清，杭州四季青生物公司产品;二甲基亚砜(DMSO)，噻唑兰(MTT)，Hochest33258购自Sigma公司;TRIzol试剂(美国 Invitrogen公司)，反转录试剂盒(美国Promega公司)，Taq酶(美国MBI公司)，其他试剂均为国产或进口分析纯。……