GLUT4 mRNA在糖尿病大鼠骨骼肌及脂肪组织中的表达及意义
2011-05-23任剑明纪红梅
金 实,刘 聪,任剑明,纪红梅,任 蕾
(1中国医科大学附属第四医院,沈阳110032;2中国医科大学附属盛京医院;3东北制药集团;4郑州大学第一附属医院)
葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)是一种跨膜转运蛋白,作为促进葡萄糖转运的载体,其表达及功能改变可能与骨骼肌、脂肪组织的胰岛素抵抗密切相关。2010年5月,我们对GLUT4 mRNA在糖尿病大鼠骨骼肌及脂肪组织中的表达情况进行了观察,旨在进一步探索2型糖尿病发病的分子机制。
1 材料与方法
1.1 材料 健康雄性SD大鼠46只,体质量180~220 g(中国医科大学动物部);链脲佐菌素(STZ),RNA 提取液,DL2000DNA Marker,GLUT4及β-actin上下游引物;胰岛素放射免疫试剂盒,RT-PCR试剂盒。
1.2 动物分组及处理 将46只SD大鼠随机分为对照组及高脂组各10只、高血糖组及糖尿病组各13只,各组均自由摄食(常规饲料)、饮水,12 h光照周期,室温保持18~28℃,1周后禁食12 h,断尾取血测空腹血糖。其后高脂组和糖尿病组饲喂高脂饮食(于常规饲料中分别以30%、10%、3%加入猪油、白砂糖、鸡蛋黄,蛋白质、脂肪、碳水化合物所占比例分别为9.3%、59.1%、31.6%),对照组和高血糖组则继续饲喂常规饲料,其中高血糖组同时于腹腔内注射STZ 55mg/kg、其余三组腹腔内注射等量柠檬酸缓冲液,72 h后高血糖组断尾取血,测血糖>16.7 mmol/L、尿糖3+~4+持续3 d视为高血糖造模成功。其后各组同前饲养,6周后各组禁食12 h、称体质量,糖尿病组腹腔内注射STZ 30mg/kg,其余三组腹腔内注射等量柠檬酸缓冲液,72 h后糖尿病组断尾、取血,测血糖及尿糖达上述标准视为2型糖尿病造模成功[1]。各组均继续饲养4周至第10周结束实验。实验过程中糖尿病组造模失败2只、死亡1只,高血糖组造模全部成功、死亡4只。……
