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丹参干预成纤维细胞增生及其机制

2011-05-21张诚玥李根林

眼科新进展 2011年9期

张诚玥 李根林

增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是视网膜脱离复位手术后常见并发症之一,它以细胞迁移进入玻璃体和视网膜表面及细胞增生为特征。研究表明[1-2],视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等均参与了PVR的形成过程,而玻璃体的纤维增生和牵拉性视网膜脱离往往导致视力的丧失。虽然目前玻璃体视网膜手术可使视网膜解剖复位,但手术并不能阻止反而可能刺激眼内细胞发生迁移、增生,导致PVR复发。因此,探索药物防治PVR形成具有重要意义。近年来,关于药物防治PVR的研究报道多见[3-4],但多因这些药物的作用短暂或毒性较大而难以应用。本研究探讨丹参对成纤维细胞增生可能具有的干预作用,为防治PVR复发、提高临床疗效提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 健康成年青紫蓝兔2只,平均体质量2 kg,购自首都医科大学动物实验中心。

1.1.2 主要试剂和仪器 丹参(北京同仁堂集团公司);低糖 DMEM、2.5 g·L-1胰蛋白酶、类胎牛血清、3 g·L-1H2O2甲醇溶液、1 g·L-1TritonX-100(北京民海生物公司);免疫组织化学试剂盒、TUNEL试剂盒(北京中杉金桥生物公司);AnnexinV-FITC试剂盒(北京晶美生物公司);地塞米松(美国Sigma公司);5-氟尿嘧啶和氢化可的松(天津金药厂);MTT(美国Sigma公司);DMSO(二甲基亚砜,北京莱博公司);细胞培养箱(德国Heraeus公司);倒置显微镜(日本Olympus公司);流式细胞仪(美国BD公司)。

1.2 方法

1.2.1 单味生药配制 取丹参20 g,先后加200 mL、100 mL、100 mL双蒸水分别煮提30 min后浓缩定容至45 mL,终浓度为444 g·L-1,过滤去除杂质即可。实验所用不同浓度丹参pH值均为6.8~7.3,渗透压均为290 ~340 mOsm·L-1。

1.2.2 成纤……

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