徐新荣 张奕华 吉 洁 彭司勋

年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration，AMD)继发的脉络膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)是老年人不可逆性视功能损害的主要原因之一。CNV的药物治疗主要有皮质类固醇抗炎药和VEGF拮抗剂。长期使用皮质类固醇会导致眼压升高;VEGF拮抗剂需要反复眼内注射，有发生眼内炎、视网膜脱离、晶状体损伤等并发症的风险，且长期使用的生物安全性尚待进一步观察。因此，寻找多途径防治CNV的药物有积极意义。

炎症过程在CNV的发生发展中起重要作用。基于此，我们将自主合成的非甾体抗炎药苯基呋咱氮氧化物与双氯芬酸藕联化合物ZA-76应用于激光诱导的棕色挪威大鼠CNV模型，观察ZA-76对CNV形成的抑制作用，通过检测 ZA-76对环氧化酶-2(COX-2)和VEGF表达的影响、对高眼压兔眼血流以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)生长的作用，探讨其作用机理。

1 材料与方法

1.1 实验材料及试剂 HUVEC来源于中科院上海细胞库;DMEM培养基、胎牛血清为Gibco公司产品;胰蛋白酶、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)为Sigma公司产品;彩色微球及相关试剂为美国E-Z Trac公司产品;ZA-76由中国药科大学新药中心提供;100 g·L－1荧光素钠溶液为广西梧州制药公司产品;VEGF一抗为 Biological公司产品;COX-2一抗、MaxVisionTM二抗及DAB显色剂为福州迈新生物技术公司产品。

1.2 ZA-76对鼠眼CNV的抑制作用及对VEGF、COX-2表达的影响

1.2.1 CNV动物模型制作与分组 雄性棕色挪威大鼠(北京维通利华公司)30只(60眼)，体质量约180～200 g。5 g·L－1托品卡胺+去氧肾上腺素散瞳后，100 g·L－1水合氯醛(3.5 mL·kg－1)腹腔注射麻醉，在132 D前置镜下，距视盘2～3个视盘直径，用多波长氪激光机围绕视盘均匀光凝8个点。……