王玉梅 曹 凯 刘永平 秦博文 商亚珍

(河北省重要研究与开发重点实验室/承德医学院中药研究所，承德 067000)

慢性脑缺血是指各种原因引起长期的脑灌流不足，伴发于多种临床神经系统性疾病，如动脉粥样硬化、血管性痴呆及阿尔茨海默病等。而这些疾病的发生涉及胆碱能系统、一氧化氮、兴奋性氨基酸、线粒体损伤及氧化自由基系统等多方面［1-2］。其中胆碱能系统和一氧化氮及其合成酶的异常变化与脑缺血损伤引起的神经功能障碍密切相关，已经得到研究人员的高度重视。

目前，在临床上采用一系列方法治疗脑缺血引起的神经损伤，而中药复方或其提取活性成分在防治缺血性脑损伤方面已显示出良好的效果，并已成为研究的热点。黄芩茎叶黄酮(flavonoids from stem and leaf of scutellaria baicalensis georgi，SSF)是从中药黄芩地上部分提取分离的黄酮类化合物，本实验室先前利用多种体内外模型已经确定了SSF具有抗炎、抗氧化、抗缺氧和改善记忆障碍等作用［3-6］。本研究采用大鼠双侧颈总动脉结扎建立慢性脑缺血模型，利用大鼠Morris水迷宫行为实验和免疫组织化学的方法，进一步探讨SSF对脑缺血性记忆障碍的改善作用，并通过测定脑内胆碱乙酰转移酶(chloine acetyltransferase，ChAT)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)蛋白表达揭示其作用机制。

1 材料和方法

1.1 实验动物和试剂

健康雌性SD大鼠300～320 g，购买于河北医科大学实验动物中心(合格证编号:90912);SSF(承德医学院中药研究所提供);抗ChAT、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)抗体、免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。……