谢芬方建业潘经锐黄小雄王艺东

·论 著·

脑缺血再灌注早期梗死灶边缘区TLR9信号通路的活化☆

谢芬*方建业*潘经锐*黄小雄*王艺东*

目的 观察大鼠脑缺血再灌注早期梗死灶边缘区皮层Toll样受体9（Toll-like receptor 9，TLR9）信号通路的活化情况。方法 制备Sprague-Dawley（SD）大鼠短暂大脑中动脉闭塞模型，缺血90 min后再灌注，随机分两组：6 h组（n＝5）和3 d组（n＝5），分别采用RT-PCR、Western-blot法测定梗死灶边缘区皮层TLR9、肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、干扰素调节因子7（interferon regulatory factor 7，IRF7）、干扰素－β（interferon-beta，IFN-β）的mRNA及蛋白表达。结果 6 h和3 d组TLR9、TNF-α、IRF7、IFN-β的mRNA表达量分别为（0.43±0.03）和（0.93±0.03）、（1.21±0.11）和（2.26±0.16）、（0.44±0.04）和（1.27±0.17）、（0.15 ±0.02）和（0.26±0.03），蛋白表达量分别为（0.75±0.04）和（1.35±0.04）、（0.93±0.04）和（1.05±0.02）、（0.54 ±0.03）和（0.73±0.02）、（0.82±0.02）和（0.93±0.03）（组间比较，均P＜0.01）。同组内TNF-α的表达明显高于IFN-β的表达（均P＜0.01）。结论 TLR9信号通路在脑梗死早期的炎症反应中可能起重要作用。

Toll样受体9 脑缺血再灌注 大鼠

炎症反应在脑缺血损伤的病理机制中起着重要的作用，早期造成组织损伤，而后期可能具有内源性修复作用［1］。炎症反应的这种“双刃剑”作用的机制是什么还不清楚。近年研究发现，先天免疫系统的重要组成部分——Toll样受体 （Toll-like receptors，TLRs）介导了缺血性损伤［2］，其中一个重要作用就是参与炎症反应。TLR9是Toll样受体家族的重要成员，定位在细胞内的内涵体膜上，在中枢神经系统中TLR9主要表达于小胶质细胞。它不仅可以被来自病原体的配体激活，而且能被组织损伤后产生的DNA片段激活。TLR9拥有两条不同的信号传导通路，分别经过转录因子NFκB（nuclear factor kappa B）或IRF7途径，诱导促炎因子TNF-α或神经保护分子IFN-β的产生。这两条通路在脑缺血后不同阶段如何发挥作用还没有研究报道。本研究拟观察大鼠脑缺血再灌注早期梗死灶边缘区皮层TLR9信号通路的活化情况，初步探讨TLR9信号通路在脑缺血损伤中所起的作用。……