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(1青岛市第三人民医院,山东青岛 266041;2青岛大学医学院)

目前认为慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病与气道炎症、氧化反应等因素有关[1]。氨溴索是一种较新的黏液溶解剂,具有呼吸道润滑、祛痰、抗氧化、清除氧自由基及抑制炎性细胞因子等作用[2,3]。2008年 4月～2010年 9月,本研究建立了大鼠 COPD模型,观察了氨溴索对 COPD大鼠模型肺组织病理改变及其 COX-2表达的影响。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 Wistar大鼠由青岛市药检所动物养殖中心提供;COX-2大鼠单克隆抗体;SP免疫组化染色试剂盒。

1.2 动物分组与 COPD模型的建立 健康雄性Wistar大鼠 32只,鼠龄 12周,体质量(240±20)g,清洁级。随机分为以下 3组:①对照组:8只,室内正常喂养,腹腔内注射灭菌生理盐水 1 ml,1次/d,共 40 d。②模型组:12只,用香烟熏吸加气管内注射 LPS法建立 COPD模型。分别于第 1、21天向大鼠气管内注入 LPS各 200μg(共 200μl),第 2～20天、第 22～40天将大鼠置于密闭有机玻璃熏箱内,注入香烟烟雾,每次 10支香烟,持续 2 h,2次/d。第 1～40天腹腔注射灭菌生理盐水 1 ml,1次/d。光镜及电镜下观察后判定模型建立情况。③氨溴索组:12只,在建立大鼠 COPD模型的第 10天起每天腹腔注射氨溴索 40 mg/kg,1次/d,共 40 d。

1.3 动物处理及肺组织形态学观察 40 d后对大鼠行腹腔麻醉,常规灌流固定后解剖,将肺组织离体,甲醛固定,常规石蜡切片,HE染色,光镜观察肺组织上皮结构、纤毛、肺泡的变化情况;每组各切取3份截面约 2 mm×10 mm的肺组织条,固定、脱水、包埋、切片、染色后透射电镜下观察。

1.4 肺组织中 COX-2的测定 采用免疫组化 SP法。PBS液代替一抗作阴性对照。每组动物取 15张切片,以细胞质出现棕黄色颗粒为 COX-2阳性。……