罗俊辉,邹良健＊,黄盛东,龚德军,刘广洛,马春生

(1第二军医大学长海医院,上海 200433;2中国人民解放军第 150中心医院)

ABCG2作为一种重要的肿瘤多药耐药蛋白,不仅在肿瘤的多药耐药中发挥作用,而且还是肿瘤干细胞的候选标记物[1]。对其在肿瘤细胞中的分布及作用进行研究具有重要意义。本研究观察了食管癌组织中ABCG2的表达变化,并探讨其意义。

1 材料与方法

1.1 标本收集 80例新鲜食管癌及癌旁正常食管组织来源于长海医院胸心外科2006年 1月 ～2007年1月行食管癌根治术的患者(所取标本均经患者知情同意),术后均经病理学检查确诊。手术切除肿瘤标本5m in内,用无菌手术刀片切取数块1 cm×1 cm ×1 cm的肿瘤组织(避开坏死部分)和距肿瘤组织尽量远的正常食管组织,立即置于液氮中保存。患者均行电话随访,了解术后生存时间(至2009年1月)。

1.2 ABCG2检测 ①免疫组化染色：将组织从液氮中取出,常规石蜡包埋及切片,HE染色。用Envision法行ABCG2的免疫组化染色：切片置入0.01 M柠檬酸盐缓冲液中,煮沸 20min修复抗原,血清封闭液封闭20min,一抗采用抗兔ABCG2单克隆抗体,DAB显色,苏木精衬染,封片后在显微镜下观察。不加一抗作空白对照,人胎盘作阳性对照。ABCG2阳性表达为细胞膜及细胞质内有棕黄色颗粒。利用数码相机拍摄切片的高倍视野(×400)病理照片,在电脑上计数ABCG2阳性细胞。每个病例取3张切片(正常组织和癌组织各 3张),每张切片取 5个高倍镜视野计数阳性细胞数,取其平均数(每高倍视野),并按照以下标准确定该例的ABCG2分级：无阳性……