快速右房起搏制备猪房颤模型及其心肌组织中抗凝血酶测定的研究
2011-04-13张卓琦张超群王志荣
李 飞,张卓琦,张超群,徐 晤,王志荣*
(1徐州医学院研究生部,江苏徐州221004;2徐州医学院附属医院)
房颤(AF)是临床上最常见的一种心律失常,总发病率约0.89%,其中>60岁年龄组发病率约为5.9%[1]。栓塞是AF最重要的并发症[2],原因为心房内附壁血栓形成,但机制尚不明确。2008年10月,我们采用快速右房起搏法制备猪AF模型并采用质谱法(MALDI-TOF MS/MS)[3]对猪心肌组织中抗凝血酶表达进行了测定,旨在为进一步治疗AF提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料 健康家猪12只,年龄2~3个月,雌雄不拘,体质量(37.4±2.5)kg,随机分为模型组和对照组各6只;Protein IEF cell型等电聚焦仪、ProteinⅡⅪcell型垂直电泳槽、GS-800光密度扫描仪;埋藏式高频率起搏器(南京医科大学);“J”形锚状心房单极电极;固相pH梯度干胶条(IPG dry strip,pH值4~7、17cm),乙二胺四乙酸(EDTA),四甲基乙二胺(TEMED),丙基硫酸盐(CHAPS)。
1.2 AF模型制备及鉴定 ①模型制备:参考Chen等[4]快速右房起搏法并加以改良。两组均以3%戊巴比妥钠麻醉,采用Seldinger血管穿刺技术穿刺右侧颈内静脉,模型组植入心房单极起搏电极,用起搏分析仪测量起搏参数(电压阈值<1 V,阻抗500~1 000 Ω),满意后将电极尾端与高频心脏起搏器相连,体外磁铁设定参数:起搏方式为AOO,脉冲频率520次/min,脉冲幅度≥5 V,脉冲宽度0.15 ms,测试满意后埋置起搏器。对照组仅植入电极,不予起搏。两组术后均常规抗感染4 d。②鉴定:AF模型制备前及制备2周后,分别采用程序刺激对两组行电生理检查,其中程序刺激驱动周长(S1S1)为300 ms,S1S2间期为心房有效不应期+50 ms,步长5 ms反扫直至不应期;不能诱发AF时引入S3,S2S3间期从S1S2的80%开始,步长5 ms反扫直至S3落入不应期;仍不能诱发AF时引入S4;S4未能诱发AF时,采用12 Hz、脉宽2 ms、4倍阈值的Burst(500次/min)刺激诱导。……
