曾德贵，刘玉琴

(1.广东省深圳市慢性病防治中心，广东 深圳 518020; 2.北京大学深圳医院，广东 深圳 518048)

抗结核病药异烟肼在临床应用中可引起约20%的肺结核病患者出现肝功能变化。异烟肼进入人体后经酰胺酶催化，直接或间接生成肼(hydrazine)，肼可引起肝脏出现甘油三酯积聚、三磷酸腺苷(ATP)耗竭等毒性反应，是异烟肼致肝损伤的重要毒性代谢产物。结核杆菌对异烟肼极易产生耐药性，并且随着用药时间的延长，异烟肼血药浓度持续升高，易致结核病患者出现严重肝损伤，因此应在使用过程中进行血药浓度监测[1－2]。目前，测定异烟肼血药浓度有许多方法[3－5]，但大都存在提取率低、操作烦琐的问题。笔者对以前的方法作了综合改进，将异烟肼进行柱前衍生化，降低其极性，增强其紫外吸收，旨在建立一种灵敏度高、特异性好的反相高效液相色谱法以测定血浆中异烟肼的质量浓度。

1 仪器与试药

LC－1型高效液相色谱仪(日本岛津);TGL－16G型台式高速离心机。异烟肼标准品(美国Sigma公司，批号为22409231);异烟肼片(沈阳红旗制药有限公司，规格为100 mg/片，批号为080615);香草醛、三氯醋酸、三乙胺、磷酸二氢钾、甲醇均为国产分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:YWG－C18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm);预柱:YWG－C18柱(25 mm ×6 mm，5 μm);流动相:V(0.02 mol/L KH2PO4)∶V(CH3OH)=61∶39，每 500 mL流动相加入 70%(V/V)的 HClO40.2 mL 及 20%(V/V)的三乙胺 0.4 mL;检测波长:340 nm;流速:1 mL/min;进样量:20 μL。在此色谱条件下，色谱峰峰形好、分离完全，血浆中内源性物质不干扰异烟肼的测定，异烟肼衍生物保留时间为11.08 min，香草醛保留时间为8.46 min，全程测定时间约13 min，色谱见图1。……