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反相高效液相色谱法测定苦豆子总碱中槐定碱含量*

2011-03-06

中国药业 2011年3期

(广东医学院药学院,广东 东莞 523808)

苦豆子 Sophora alopecuroides L.为豆科槐属多年生草本植物,主要分布于我国西北荒漠地区,生态适应性强,资源丰富,其药用部位为可再生的地上部分,味苦性寒,具有清热解毒、祛风燥湿、止痛杀虫等作用,在民间广泛用于痢疾、肠炎等疾病[1]。苦豆子含有多种生物碱,其中苦参碱和槐定碱,槐果碱和苦豆碱,氧化苦参碱和氧化槐定碱,槐胺碱、新槐胺碱和异槐胺碱,3α-羟基槐定碱和脱氧槐定碱等均分别属于同分异构体,在不同条件下各成分间可能存在着生物转化等[2],分离难度较大。目前国家药品标准对苦豆子总碱中槐定碱的含量测定方法所用色谱柱选择条件较为严格。笔者采用NH2柱建立了苦豆子总碱中槐定碱的含量测定方法,现报道如下。

1 仪器与试药

HP-1100型高效液相色谱仪,G1315A型紫外-可见光二极管阵列检测器;超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);德国Sartorious CP225D型万分之一天平。槐定碱对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号为110784-200303);苦豆子总碱(批号为20070212,宁夏盐池制药有限公司);乙腈为色谱纯,水为重蒸水,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Kromasil100-5NH2柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈- 磷酸水溶液(pH为2)-无水乙醇(80∶8∶10);检测波长:205 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃。理论板数按槐定碱峰计不得低于2 000。取对照品溶液和供试品溶液,用 0.45 μm 滤膜过滤,进样 20 μL,记录峰面积相应值,以外标法计算含量即可。高效液相色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取槐定碱对照品5 mg,置50 mL量瓶中,用乙腈-无水乙醇(8∶1)流动相溶解并稀释至刻度,即得每1 mL含槐定碱对照品0.5 mg的对照品溶液。……

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