张一飞，郭守利，刘 晔，朱大岭

（1.哈尔滨医科大学第二临床医学院药学部，哈尔滨 150086；2.哈尔滨医科大学第二临床医学院实验动物中心，哈尔滨 150086；3.哈尔滨医科大学药学院，哈尔滨 150086）

肺血管收缩反应增强和结构重建是低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary hypertension，HPH）的重要特征，其主要表现形式是肺血管收缩和中膜平滑肌细胞的增殖和迁移，但其机制尚未明确。近来关于花生四烯酸（arachidonic acid，AA）及其一系列代谢产物在肺动脉收缩节律的调节作用越来越受到人们的关注。15-酮基二十碳四烯酸（15-KETE）是AA的15-脂质氧化酶（15-LO）一种代谢终产物，同时也是AA的15-LO另一种代谢产物15-HETE脱氢氧化产物［1，2］。有研究表明缺氧可上调肺动脉平滑肌细胞15-LO的表达［3］，因此缺氧时AA的代谢产物有其相应的细胞分布及相应的作用位点。

电压门控钾通道（KV）作为肺动脉平滑肌细胞的氧感受器，在缺氧性肺动脉高压发病中的重要性越来越受到重视。有研究报道15-HETE通过抑制Kv通道引起肺动脉收缩［3］，15-KETE对大鼠肺动脉环的收缩作用比15-HETE更强烈［4］，其收缩作用依赖于Kv通道、细胞外液钙离子和L-型钙离子通道［5］，外源性15-KETE能浓度依赖性地抑制常氧大鼠PASMCs IK［6］V。本实验观察了15-KETE对缺氧大鼠PASMCs IKV的影响，并与其对常氧大鼠PASMCs IKV的作用加以比较，为进一步阐明15-KETE收缩肺动脉离子通道机制提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：12只健康雄性SD大鼠，体重200±20g，由哈尔滨医科大学实验动物学部提供［SCXK（黑）2006-033］。

1.1.2 药品与试剂：胶原酶I型，弹性酶，BSA，TEA，Na2ATP，Na2GTP，HEPES和BAPTA（Sigma，美国）；DTT（Roche，美国），15-KETE（Biomol，美国），其余试剂均为国产分析纯产品。

1.1.3 主要仪器：体视解剖显微镜（SMZ-168，Motic），膜片钳仪，Axopatch 200B，USA；……