丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂对人精子活动力的影响
2011-02-13丁玉芹汪存利
丁玉芹,姜 宏,汪存利
(安徽医科大学解放军临床学院生殖医学中心,安徽合肥 230031)
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,有报道[1]其家族成员细胞外信号调节激酶(extracellularsignal regulated protein kinase,ERK)和p38MAPK定位于精子尾部中段,参与精子活动力的调节;17-β雌二醇可通过PI3K/Akt通路激活ERK,增加精子活动力,并且ERK是在精子由静止状态转变为运动过程中逐渐被活化的,抑制内源性ERK可以使精子鞭毛活力下降[2-3]。从理论上讲,增加或降低ERK和p38的活性可调节精子活动力。鉴于此,我们以ERK和p38信号转导通路特异性抑制剂PD98059和SB203580作用于精子细胞,旨在探讨PD98059和SB203580对精子ERK和p38MAPK及精子活动力的调节作用,为弱精子症的发病机制和临床治疗途径作一探索。
1 资料与方法
1.1研究对象研究对象来自于解放军105医院生殖医学中心门诊的男性不育患者,按照世界卫生组织精液分析标准(1999),分别收集正常对照组和弱精子症组标本各15份。每份标本均经两次以上检查核实,且巴氏染色后精子正常形态率均>15%。为避免其它细胞(生精细胞、白细胞和上皮细胞)的污染,按文献方法[4],收集精子,PBS调整精子密度至50 ×106/ml,备用。
1.2PD98059和SB203580对精子活动力的影响
1.2.1浓度对精子活力的影响 将正常对照组和弱精症组样本按每孔100 μl分别接种于96孔细胞培养板中,分为空白对照组、不同浓度PD98059组和不同浓度SB203580组,每组均设3个复孔取其平均值。在37℃、5%CO2培养箱内温育1 h后,Malker精子计数板检测各组精子活动力。
1.2.2 作用时间对精子活力的影响将正常组和弱精症组精液样本按每孔……
