冯 芹，商庆节，孙敬侠，张 峰，罗涟荣，姚景春

(鲁南制药集团新药药理中心，山东临沂 273400)

组胺是最常见的瘙痒介质，主要存在于肥大细胞内的异染性颗粒中，皮肤的角质形成细胞中也有组胺存在［1］。盐酸左旋西替利嗪是西替利嗪的左旋体，是较新的第二代H1受体拮抗剂。体外实验研究表明它可抑制嗜酸粒细胞游走［2］，可与人H1受体选择性的高亲和力结合［3］，有较好的组胺拮抗作用，还可以抑制变态反应相关的多种炎症介质的释放，同时具有较广泛的抗炎作用。有研究证实西替利嗪可能通过阻断真皮成纤维细胞上的H1受体抑制中性粒细胞和单核细胞的趋化而发挥抗皮肤过敏炎症作用［4］。目前盐酸左旋西替利嗪均为口服制剂，尚无外用制剂，我们将其制成外用搽剂，在动物模型上研究了止痒、抗过敏作用，研究体内吸收及分布情况，并与口服给药进行对比。

1 材料

1.1动物Hartley豚鼠，体质量250～300 g，购自无锡市惠山江南实验动物场，合格证号:2018933。SD大鼠，体质量150～200 g;ICR小鼠，体质量18～22 g，均由山东新时代药业实验动物中心提供，动物合格证号:0008036。

1.2试剂盐酸左西替利嗪搽剂(由鲁南贝特制药有限公司制剂实验室提供，批号:090401)，磷酸组胺(阿拉丁试剂有限公司批号:29194)，伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司，批号:20091209)。

1.3仪器UV-2000型紫外分光光度计(上海尤尼科仪器有限公司)，LC-10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津公司)。

2 方法

2.1对磷酸组胺所致的豚鼠瘙痒模型的影响白色Hartley豚鼠(♀♂各半)，按性别、体质量随机分为4组:基质组、盐酸左旋西替利嗪搽剂3个浓度组(0.625、2.5、10 g·L－1)(n=8)，各搽剂组在致痒前30 min涂抹盐酸左西替利嗪搽剂，基质对照组抹基质，涂药面积约1 cm2，剂量约为0.3 ml·cm－2，口服给药组灌胃给予盐酸左西替利嗪水溶液(10 mg·kg－1)。具体实验方法参照文献［5］。

2.2对大鼠同种被动皮肤过敏反应(PCA)模型的影响SD大鼠，分组同“2.1”(n=10)，致敏范围约4 cm2，各组于攻击前30 min在致敏部位涂抹相应搽剂，给药量约为0.05 ml·cm－2。具体实验方法参照文献［6］。

2.3对组胺致小鼠皮肤血管扩张作用的影响ICR小鼠，分组同“2.1”(n=10)，各组小鼠腹部皮肤剪毛，范围约4 cm2，涂抹相应搽剂，给药量约为0.01 ml·cm－2，口服给药组灌胃给予盐酸左西替利嗪水溶液(20 mg·kg－1)，具体实验方法参照文献［6］。

2.4两种给药途径在大鼠体内的血药浓度SD大鼠，按性别、体质量随机分为两组:盐酸左西替利嗪搽剂组和口服盐酸左西替利嗪溶液组(n=6)。搽剂组背部皮肤剪毛，范围约4 cm2，涂抹 10 g·L－1的搽剂，给药量约为 0.05 ml·cm－2，口服给药剂量为 20 mg·kg－1，于给药后 0.2、0.4、0.6、0.9、1.2、1.5、2、3、4、6 h 分别于大鼠眼静脉丛采血 0.4 ml，HPLC测定血浆中左西替利嗪浓度。

2.5两种给药途径大鼠皮肤的组织分布SD大鼠，按性别、体质量随机分为两组为:盐酸左西替利嗪搽剂和口服给药组(n=20)，给药方式、剂量同“2.4”，两组大鼠给药后0.2、0.6、2、4 h分别随机脱颈椎处死5只大鼠，HPLC法测定皮肤组织匀浆中左西替利嗪含量。

2.6统计学分析实验结果以±s表示。实验数据用SPSS11.5进行统计学分析，采用one-way ANOVA检验。

3 结果

3.1对磷酸组胺所致的豚鼠瘙痒模型的影响盐酸左西替利嗪搽剂低、中、高3个浓度组致痒阈为(354.38±192.03)、(690.00±207.02)、(827.50±229.52)μg与基质组(27.50±19.64)μg相比均提高(P＜0.01)，高浓度盐酸左旋西替利嗪搽剂组致痒阈高于口服盐酸左西替利嗪组(490.00±151.18)μg(P＜0.01)。

3.2对大鼠同种被动皮肤过敏反应(PCA)模型的影响盐酸左西替利嗪搽剂低、中、高3个浓度组吸光度为(0.081±0.041)、(0.052±0.025)、(0.036±0.015)，低于基质组(0.120±0.101)，抑制率分别为32.5%、53.4%和70.3%，中、高浓度与基质组相比差异具有显著性(P＜0.05，P＜0.01)。

3.3对组胺致小鼠皮肤血管扩张作用的影响盐酸左西替利嗪搽剂低、中、高3个浓度组蓝染面积为(29.04±6.22)、(12.95±3.41)、(7.85±5.57)mm2，与基质组(125.21±17.40)mm2相比减少(P＜0.01)，抑制率分别为76.80%、89.66%和93.73%，高浓度组与口服组(23.12±7.68)mm2比蓝染面积减少(P＜0.01);低、中、高3个浓度组吸光度分别为(0.127±0.031)、(0.089±0.027)、(0.079±0.025)，与基质组(0.457±0.127)相比降低(P＜0.01)，抑制率为72.16%、80.54%、82.73%，高浓度组与口服组(0.131±0.018)相比，吸光度降低(P＜0.01)。

3.4两种给药途径在大鼠体内的血药浓度用DAS2.1.1药代数据处理软件，计算大鼠口服盐酸左西替利嗪和大鼠皮肤涂抹盐酸左西替利嗪搽剂后的药代动力学参数，采用非房室模型计算获得的各只大鼠的药代参数。给予盐酸左西替利嗪搽剂时其主要药动学参数为:Tmax=(0.9±0.19)h;Cmax=(1.307±0.161)mg·L－1=(1.749±0.287)h;AUC0-t=(2.505±0.189)mg·h·L－1;AUC0-∞=(2.776 ±0.151)mg·h·L－1;MRT0-∞=(2.598 ±0.290)h。口服给予盐酸左西替利嗪溶液时其主要药动学参数为:Tmax=(0.667±0.197)h;Cmax=(12.915±2.128)mg·L－1;=(1.231±0.337)h;AUC0-t=(26.172 ±5.075)mg·h·L－1;AUC0-∞=(27.474 ±6.037)mg·h·L－1;MRT0-∞=(2.126 ±0.336)h。

3.5两种给药途径在大鼠皮肤的组织分布大鼠皮肤涂抹盐酸左西替利嗪搽剂后0.2、0.6、2、4h其组织分布分别为(19.796±3.508)、(24.512±4.442)、(32.497±3.747)、(28.503±3.139)μg·g－1。大鼠口服盐酸左西替利嗪后其0.2、0.6、2、4 h其组织分布分别为(1.107 ±0.272)、(1.797±0.303)、(0.709 ±0.036)、(0.393 ±0.078)μg·g－1。

4 讨论

研究结果显示盐酸左西替利嗪搽剂可以明显提高磷酸组胺致豚鼠瘙痒阈值，对磷酸组胺所致的豚鼠瘙痒模型有明显的抑制作用，对卵白蛋白联合百日咳所致的大鼠被动皮肤过敏反应有明显的抑制作用，对组胺致小鼠皮肤血管扩张具有明显的抑制作用，而且外用搽剂效果优于口服给药。

对口服和外用搽剂大鼠血药浓度和皮肤组织分布进行研究后发现，外用盐酸左西替利嗪搽剂的血药浓度远远低于口服给药，而皮肤组织浓度则远远大于口服给药后的皮肤组织浓度，外用搽剂较低的血药浓度能减少不良反应，而在皮肤组织的高浓度的分布能增加左西替利嗪在皮肤中的作用强度，提高对局部过敏性皮肤病的治疗效果。

［1］Hill S J.Distribution，properties，and functional characteristics of three classes of histamine receptor［J］.Pharmacol Rev，1990，42(1):45－83.

［2］Thomson L，Blaylock M G，Sexton D W，et al.Cetirizine and levocetirizine inhibit eosinophil-induced eosinophil transendothelial migration through human dermal or lung microvascular endothelial cells［J］.Clin Exp Allergy，2002，32(8):1187 －92.

［3］Gillard M，Van Der Perren C，Massingham R，et al.Binding characteristics of［3H］levocetirizine to cloned human H1histamine-receptors expressed in CHO cells［J］.Inflamm Res，2002，51(Suppl 1):77－8.

［4］宋洪杰，胡晋红，黄 瑾，等.西替利嗪干预组胺诱导的真皮成纤维细胞IL-8和MCP-1产生［J］.中国药理学通报，2005，21(4):457－60.

［4］Song H J，Hu J H，Huang J，et al.The intervention effects of cetirizine on interleukin-8 and monocyte chemotactic protein-1 induced by histamine in dermal fibroblast cells［J］.Chin Pharmacol Bull，2005，21(4):457 － 60.

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［5］Pan J Y，Qu Y S，Yan H C，et al.The anti-itching and anti-hypersensitivity effects of Doxepin hydrochloride cream［J］.Chin Pharmacol Bull，2005，21(12):1505 － 8.

［6］徐叔云，卞如濂，陈 修，主编.药理实验方法学［M］.北京:人民卫生出版社，2002:826－9.

［6］Xu S Y，Bian R L，Chen X，chief ed.Pharmacological experiment methodology［M］.Beijing:People's Medical Publishing House:2002:826－9.