刘明华,任美萍,李 蓉,章 卓,肖顺汉

(泸州医学院药理教研室,四川泸州 646000）

肿瘤化疗新的治疗手段中,耐药逆转剂是一类很有实用价值的新型药物,它们能增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,从而提高药物疗效[1]。顺铂(cisplatin,DDP)为一广谱、高效抗癌药,对卵巢癌、睾丸癌、头颈部癌及肺癌均有较高疗效,但由于耐药性的产生使其不能发挥应有的作用,常常导致化疗失败[2-3]。因此,提高卵巢癌的化疗敏感性,降低化疗耐药尤其是对最常用的化疗药物顺铂的耐药性是改善临床预后的关键[4-5]。本研究采用人卵巢癌细胞株COC1为诱导对象,采用逐步递增DDP浓度、间歇作用的体外诱导法,建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,并研究川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂 川芎嗪(tetramethy lpy razine),无色针状结晶,纯度大于或等于98%,由上海楚柏实验室设备有限公司提供。精确称取川芎嗪100mg,溶于10 m L单 RPM I-1640培养液,以0.22 nm超滤除菌器过滤除菌,制成10 mg/m L的川芎嗪浓缩含药培养液,临用前用培养液稀释备用。顺铂注射液来自云南个旧生物药业有限公司,RPM I-1640为Gibco公司产品,胰蛋白酶为美国Sigma公司产品,胎牛血清为天津灏洋生物制品科技责任有限公司产品,CCK-8(cell counting kit-8)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和GSSG试剂盒为碧云天生物技术研究所产品。

1.2 细胞株 亲代卵巢癌细胞COC1来自分化差的人卵巢腺癌患者的癌性腹水,由中国医学科学院肿瘤所1993年建株,由中国典型培养物保藏中心(CCTCC)提供。采用含10%胎牛血清的RPM I-1640、pH 7.4完全培养基,在 37℃、5%CO2条件下常规培养。……