液相色谱质谱联用技术在中药研究中的应用进展
2011-02-09王宇歆刘洪斌李东华
王宇歆,刘洪斌,李东华
中药研究手段的现代化是中药现代化最重要的组成部分,其中包括用现代科技手段对中药有效成分确定,中药的生产和质量控制,以及中药代谢过程确定等一系列的问题。其中高效液相色谱与质谱联用技术(high performance liquid chromatograph-mass spectrometer,HPLC-MS)将色谱的分离能力与高分辨光谱的表征能力相结合,不仅具有色谱的高效、准确、灵敏度高、重复性好、操作方便、使用范围广等优点,同时具有定性、定量能力强的特点,非常适合活性成分复杂、含量低的植物药研究,为中药中有效成分的定性、定量及中药代谢等问题的解决提供了强有力的工具和手段[1]。
1 质谱技术简介
质谱仪器一般由真空系统、进样系统、离子源、质量分析器和计算机控制与数据处理系统等部分组成[2],质谱仪需要在高真空下工作:⑴大量氧会烧坏离子源的灯丝;⑵用作加速离子的几千伏高压会引起放电;⑶引起额外的离子-分子反应,改变裂解模型,谱图复杂化。
目前常用的高效液相色谱与质谱联用具有两大分类系统,一种是从质谱的离子源角度来划分,包括电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI)、大气压化学电离源(atmospheric pressure chemical ionization,APCI)、大气压光电离源(atmosphere pressure Interface,APPI)和基质辅助激光解析电离源(matrix-assisted laser desorption/ionization,MALDI)等[3];另一种是从质谱的质量分析器角度来划分,包括四极杆、离子阱、飞行时间(Time-of-Flight,TOF)和傅立叶变换质谱等[4]。
从离子源角度来看,ESI适合于中高极性的化合物,特别适合于反相液相色谱与质谱联用,是目前液质联用中应用最广泛的一种离子化方式,ESI-MS的优点还在于它是一种浓度型检测器,因此可以不受样品量的限制,近几年发展起来的微喷雾和纳喷雾技术尤其适合微量样品的高灵敏度分析[5]。……
