吕爱红 朱帅科 张晓曼

郑州市第一人民医院 郑州 450004

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是以学习、记忆等认知功能下降为临床特征的神经系统变性疾病,β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积是 AD的主要病理学特征。较多研究证实2型糖尿病影响认知功能,而AD被认为是一种3型糖尿病[1]。胰岛素抵抗是2型糖尿病病理机制之一,本实验通过观察胰岛素抵抗大鼠脑海马区Aβ的表达及认知功能的改变,旨在探讨胰岛素抵抗与AD的关系,为AD的发病机制提供一定的基础理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 4～5周龄清洁级健康雄性Wistar大鼠30只,体质量180～200 g,购于郑州大学实验动物中心。兔 Aβ40一抗(购于武汉博士德生物工程有限公司),辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗(购自北京中杉金桥生物技术有限公司),血糖仪(美国强生公司产品),Morris水迷宫(北京硕林苑科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 模型制备和分组：将30只Wistar雄性大鼠,按照随机数字表法分组,每组15只。正常对照组(NC组)给予标准啮齿类动物饲料喂养,模型组给予高糖高脂饲料喂养(饲料成分：10%猪油,20%蔗糖,2.5%胆固醇,1%胆酸盐,6.5%常规饲料),诱导出胰岛素抵抗模型。

1.2.2 Morris水迷宫实验：水迷宫为一个不锈钢圆形水池,直径100 cm,高 60 cm,内置无色有机玻璃平台,平台高40 cm,在水池壁东西南北部位分别标明入水点。将平台放在西南象限正中处,迷宫中含牛奶液面高于安全平台1 cm,水温(22±1)℃,加适量奶粉使水呈乳白色,实验期间环境安静,迷宫外参照物不变。该实验历时5 d,每天上下午2个时间段,每个时间段训练4次,每次训练随机找个入水点,将大鼠面向池壁放入水池,同一次训练所有大鼠入水点相同,记录大鼠从入水找到平台的时间即逃避潜伏期。……