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补气法、化痰法对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

2011-02-06叶宗果雍苏南严浩成

中国中医急症 2011年6期
关键词:手术模型

叶宗果 雍苏南 严浩成

1广东省新丰县人民医院(广东新丰510095)

2湖南中医药大学第一附属医院(湖南长沙410007)

3广州中医药大学热带医学研究所(广东广州510405)

1 材料与方法

1.1 动物 健康雄性wistar大鼠50只、体质量(275±30)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,许可证号:SCXK(沪2007-0005)。

1.2 药物 选择保元汤(黄芪、人参、肉桂、甘草)为补气法之载体,瓜蒌薤白半夏汤(瓜蒌、薤白、半夏、白酒)为化痰法之载体。药材均购自湖南中医药大学第一附属医院中药房。

1.3 仪器与试剂 Micro-ESR型电子自旋共振波谱仪,美国产;TD5-Ⅱ台式离心机,长沙平凡仪器仪表有限公司生产;721分光光度计,上海第三仪器厂生产;SSW型电热恒温水槽,上海博迅实业有限公司提供;Thermo Shandon切片机,英国产;LKB-Ⅱ型超薄切片机,瑞典产;OPTON万能光学显微镜,德国产;H-600透射电镜,日本产。原位细胞凋亡检测试剂盒、Bcl-2、Bax免疫组化检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.4 分组及造模 参照文献[2]的方法,制备高脂乳剂,对50只wistar大鼠按10mL/kg灌胃,每日1次,连续12周。随机抽取2只大鼠,处死后速取主动脉,浸入4%多聚甲醛溶液中,固定48h,石蜡包埋切片,HE染色,光学显微镜下观察发现已形成粥样硬化斑块,提示造模成功。随机分成4组,即假手术组、模型组、补气法组、化痰法组,每组10只动物。在大鼠AS模型的基础上,手术建立大鼠MIRI模型:大鼠称体质量后,予氯胺酮80mg/kg经腹腔注射麻醉。气管切开接呼吸机人工呼吸,记录Ⅱ导联心电图。开胸后以左冠状静脉主干为标志结扎左冠状动脉。……

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